1 范围
本标准规定了乳与乳制品中非蛋白氮含量的测定方法。
本标准适用于鲜奶、乳粉中非蛋白氮含量的测定。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其*新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 601 化学试剂 标准滴定溶液的制备
GB/T 602 化学试剂 杂质测定用标准滴定溶液的制备
GB 5009.5 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
非蛋白氮含量 non-protein-nitrogen content
蛋白质以外氮的含量。
4 方法提要
用丙酮沉淀乳蛋白,滤液水浴浓缩近干,经消化、蒸馏后用0.05mol/L硫酸滴定,计算非蛋氮含量。
5 试剂和材料
除另有规定外,所用试剂均为分析纯。
5.1 水:GB/T682规定的一级水。
5.2 丙酮。
5.3 硫酸铜(CuSO4·5H2O)。
5.4 硫酸钾(K2SO4)。
5.5 硫酸(H2SO4密度为1.84g/L)。
5.6 硼酸(H3BO3)。
5.7 甲基红指示剂(C15H15N3O2)。
5.8 溴甲酚绿指示剂(C21H14Br4O5S)。
5.9 亚甲基蓝指示剂(C16H18CIN3S·3H2O)。
5.10 氢氧化钠(NaOH)。
5.11 95%乙醇(C2H5OH)。
5.12 硼酸溶液(20g/L):称取20g硼酸,加水溶解后并稀释至1000mL。
5.13 氢氧化钠溶液(400g/L):称取40g氢氧化钠加水溶解后,放冷,并稀释至100mL。
5.14 硫酸标准滴定溶液(0.05mol/L):按GB/T 602 配制和标定。
5.15 甲基红乙醇溶液(1g/L):称取0.1g甲基红,溶于95%乙醇,用95%乙醇稀释至100mL。
5.16 亚甲基蓝乙醇溶液(1g/L):称取0.1g亚甲基蓝,溶于95%乙醇,用95%乙醇稀释至100mL。
5.17 溴甲酚绿乙醇溶液(1g/L):称取0.1g溴甲酚绿,溶于95%乙醇,用95%乙醇稀释至100mL。
5.18 混合指示液:2份甲基红乙醇溶液(5.15)与1份亚甲基蓝乙醇溶液(5.16)临用时混合。也可用1份甲基红乙醇溶液(5.15)与5份溴甲酚绿乙醇溶液(5.15)临用时混合。
5.19 滤纸:中速定性滤纸。
6 仪器和设备
6.1 分析天平:感量为0.1mg。
6.2 定氮仪。
6.3 具塞离心管:50mL。
6.4 滴定管:10mL。
7 试样制备与保存
试样混合均匀装入洁净的容器内,冷藏在0℃~4℃冰箱中。试样应在试验前预先取出,并升至室温。
8 分析步骤
8.1 试样处理
准确称取混匀的固体样品试样约1g,液体样品约10g,精确至0.001g,置于离心管中,固体样品中加入10mL水,溶解混匀。试样加入40mL的丙酮溶液(5.2),混匀,静置5min,用滤纸滤至定氮瓶中,加入微量硫酸保持溶液呈酸性,沸水浴浓缩近干。向定氮瓶中加亼0.2g硫酸铜(5.3、6g硫酸钾(5.4)及20mL硫酸(5.5),轻摇后于瓶口放一小漏斗,将瓶以45°斜支于小孔的石棉网上。小心加热,待内容物全部碳化,泡沫完全停止后,加强火力,并保持瓶内液体微沸,至液体呈蓝绿色并澄清透明后,再继续加热0.5h~1h取下冷却,小心加入20mL水,进行定氮蒸馏。
8.2 测定
按GB 5009.5 **法规定执行,定氮蒸馏后,用0.05mol/L硫酸标准滴定溶液进行滴定。
8.3 空白实验
除不加试样外,按上述步骤操作。
9 结果计算
9.1 试样中非蛋白氮的含量按式(1)计算:
X——试样中非蛋白氮的含量,%;
V1——试样消耗硫酸标准滴定溶液的体积,单位为毫升(mL);
V0——空白消耗硫酸标准滴定溶液的体积,单位为毫升(mL);
c——硫酸标准滴定溶液的浓度,单位为摩尔每升(mol/L);
0.0140——1.0mL硫酸[c(1/2H2SO4)=1.000mol/L或盐酸[c(HCl)=1.000mol/L]标准滴定溶液相当的氮的质量,单位为克(g);
m——试样质量,单位为克(g)。
9.2 扣除试剂空白的测定结果用平行测定的算术平均值表示,保留3位有效数字。
10 精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的**差值不得超过算术平均值的10%。
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