1 范围
本标准规定了甘油含量的液相色谱测定方法。
本标准适用于不同含量规格的皂化甘油和合成甘油含量的测定。
本标准也适用于定性鉴别掺有乙二醇、二甘醇、三甘醇和山梨醇等为主要原料的甘油替代品。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的*新版本。凡是不注日期的引用文件，其*新版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法(ISO 3696：1987，MOD)
3 方法提要
本方法采用氨基键合柱、反相色谱分离法，在备有示差折光检测器(RID)的高效液相色谱仪上，用外标法进行定量测定。
4 试剂和材料
除非另有规定，仅使用分析纯试剂，实验所用水应符合GB/T 6682 中一级水要求。
4.1 乙腈：HPLC级。
4.2 流动相：乙腈+水，85+15(V/V)。
4.3 甘油标准品：已知含量。
4.4 针头式尼龙质过滤器：0.45μm，直径13mm。
4.5 尼龙质或再生纤维素质过滤膜：0.45μm，直径47mm。
5 仪器
5.1 高效液相色谱仪。
5.2 检测器：示差折光检测器，并带有致冷热柱温箱。
5.3 色谱柱：NH2柱，250mm×4.6mm(i.d.)，5m或相当者。
5.4 超声仪。
5.5 容量瓶，50mL和100mL。
5.6 分析天平，感量0.1mg。
5.7 液体称量瓶，25mL。
6 色谱操作条件
6.1 流动相：乙腈十水，85+15(V/V)(4.2)，在线脱气或经当天预先脱气；
6.2 流速：1.0mL/min；
6.3 柱温：30.0℃；
6.4 RID温度：35.0℃；
6.5 进样量：10.0μL，用流动相洗针。
注：上述液相色谱条件系通用的操作参数，可根据不同仪器的特点，对给定操作参数作适当调整，以期获*佳分离效果。附录A提供了“ Agilent1100+G1362A”系统和“ Waters2695+2414”系统的典型色谱条件。有关甘油与甘醇及山梨醇的液相色谱法定性鉴别试验参见附录B。
7 测定步骤
7.1 标准溶液的配制
称取甘油标准品(4.3)约0.1g(精确至0.0002g)，置于50mL容量瓶中，用流动相(4.2)稀释至刻度，摇匀后在超声波水浴中超声约5min。于0℃~5℃存放，有效期半年。
7.2 试样溶液的配制
称取含相当于标准品约0.1g的试样(精确至0.0002g)，置于50mL容量瓶中，用流动相(4.2)稀释至刻度，摇匀后在超声波水浴中超声5min。经0.45μm针头式尼龙质过滤器(4.4)过滤。
7.3 测定
在上述操作条件下，用流动相平衡系统，待仪器稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各针峰面积响应值的重复性，待相邻两针的峰面积响应值变化小于1.0%时，则可测定样品。
丙三醇的液相色谱图参见附录C的图C.3。
8 结果计算
按式(1)计算样品中丙三醇的含量Y，以质量分数计，单位为克每千克(g/kg)：
式中：
Y——样品中丙三醇的含量，以质量分数计，单位为克每千克(g/kg)；
A标——两针标样溶液中丙三醇峰面积的平均值；
A样——两针试样溶液中丙三醇峰面积的平均值；
m标——丙三醇标样的质量，单位为克(g)；
m样——样品的质量，单位为克(g)；
P——一丙三醇标样的含量，单位为克每千克(g/kg)。
9 精密度
在8个实验室，对3个规格水平的试样进行方法精密度试验，结果见表1。
更多标准内容点击以下链接获取标准全文：
下载地址：《
