检测及试验方法
分析条件
液相条件
色谱柱：Shim-pack XR-ODS III 2.0 mmI.D.×100 mm L., 2.2μm
流动相：A相-0.1%甲酸水溶液；B相-乙腈
流速：0.3 mL/min
柱温：35℃
进样量：5μL
洗脱方式：梯度洗脱，B相初始浓度为5%，洗脱程序见表1。
质谱条件
离子化模式：ESI,正离子模式
离子喷雾电压：+4.5 kV
雾化气流速：氮气3.0 L/min
干燥气流速：氮气15 L/min
碰撞气：氩气
DL温度：250℃
加热模块温度：400℃
扫描模式：多反应监测(MRM)
驻留时间：100 ms
延迟时间：3 ms
MRM参数：见表2
对照品和样品配制及前处理方法
取对照药材或待测样品粉末0.1 g，加入1%碳酸氢铵溶液50 mL，超声处理30 min，用微孔滤膜滤过。参照《中国药典(2015版)》龟甲胶项下，取滤液100μL，置于进样瓶中，加入胰蛋白酶溶液10μL(用1%碳酸氢铵溶液配制成浓度为1 mg/mL的胰酶溶液)，摇匀，37℃恒温酶解12小时，作为对照药材溶液或供试液。
结果与讨论
龟甲胶对照药材的MRM色谱图
LCMS分析获得龟甲胶对照药材特征多肽的MRM色谱图，保留时间10.85 min，图1中两对特征离子对631.40>546.20以及631.40>921.40的信噪比分别为127479和7451，充分满足药典中要求的色谱峰信噪比大于3:1的要求。
实际样品分析
对两种市售龟甲胶药材样品进行分析，结果如图2、3和表3所示。
