液相色谱是一类分离与分析技术,它的特点是以液体作为流动相,固定相可以有多种形式。其中经典液相色谱的流动相是依靠重力缓慢地流过色谱柱,固定相的粒度不能太小,高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,采用了气相色谱的理论,流动相改成高压输送,色谱柱是用小粒径的填料填充而成的,从而使柱效大大高于经典液相色谱;同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。
液相色谱检测原理:
1、高效液相色谱法的原理是以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同*性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测。
2、高效液相色谱法的特点:
①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,所以必须对载液加高压。
②高速:分析速度快、较经典液体色谱法速度快得多。
③高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到*佳分离效果。
④高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。
⑤应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是大分子、高沸点、热稳定性差化合物的分离分析。