饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定免疫亲和柱净化-高效液相色谱法

1范围
本标准规定了饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)免疫亲和柱净化-高效液相色谱测定方法。本标准适用于饲料原料.配合饲料,浓缩饲料,精料补充料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的测定。本标准定量限为0.1 mg/kg。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其*新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T14699.1饲料采样
GB/T 20195动物饲料试样的制备
3原理
试样中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇用水提取后,提取液经免疫亲和柱净化,浓缩后,用配有紫外检测器或二*管阵列检测器的高效液相色谱仪进行测定,外标法定量。
4试剂
除另有规定外,所用试剂均为分析纯,水为符合GB/T 6682规定的二级水。4.1甲醇:色谱级。
4.2乙腈:色谱级。
4.3聚乙二醇(polyethylene glycol,M=8 0o0》。
4.4HPL.C流动相:量取100 mL.乙腈(4.2)至 1 000 mL.的容量瓶中,加入水定容至1 000 mL。混合均匀并通过0.45 em 滤膜,备用。
4.5脱氧雪腐镰刀菌烯醉(deoxynivalenol)标准品:纯度≥98%。
4.6脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准储备液:准确称取适量的脱氧雪腐镰刀茵烯醇标准品,用甲醇(4.1)配成浓度为0.1 mg/ml.的标准储备液,贮于―20 ℃冰箱保存,可使用3个月。
4.7妳脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准工作液:脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准储备液(4.6)用流动相(4.4)稀释,配制0.l ug/ml,0.5 yg/ml.1.0 ug/mL.5.0 yg/ml,10.0 ug/ml.浓度的脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准工作液。脱氧雪腐瘥刀菌烯醇标准工作液储藏在2℃-8 ℃冰箱里,可使用7天。