婴幼儿食品乳品维生素B2怎么检测?目前对于婴幼儿食品乳品维生素B2有对应的检测方法标准依据。今天百检网就给大家介绍一下婴幼儿食品乳品维生素B2的测定方法相关信息。
检测方法标准依据：GB 5413.12-2010 婴幼儿食品和乳品中维生素B2的测定
1.范围
本标准规定了婴幼儿食品和乳品中维生素B2的测定方法。
本标准适用于婴幼儿食品和乳品中维生素B2的测定。
2.规范性引用文件
本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件,其*新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。
3.原理
试样在稀盐酸环境中恒温水解,酶解,经C1s反相色谱柱分离,用荧光检测器(EX:462nm,Em：522nm)检测,外标法定量。
4.试剂和材料
除非另有规定,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。
4.1 盐酸。
4.2 三水乙酸钠。
4.3 冰乙酸。
4.4 甲醇:色谱纯。
4.5 维生素B2(核黄素)标准品:纯度≥99%。
4.6 盐酸(1+1):量取100mL盐酸(4.1)缓慢倒入100mL水中,混匀。
4.7 盐酸(0.1mol/L):吸取9mL盐酸(4.1),溶于1000mnL水中。
4.8 盐酸(0.01mol/L):吸取0.1 mol/L盐酸(4.7)50mL,用水稀释并定容至500mL。
4.9 乙酸钠溶液(0.05mol/L):称取6.80g三水乙酸钠(4.2),加900mL水溶解,用冰乙酸调pH值至4.0～5.0,用水定容至1000mL。经0.45μm微孔滤膜过滤。
4.10 乙酸钠溶液(2.0mol/L):称取27.22g三水乙酸钠(4.2),用水溶解并定容至100mL。
4.11 混合酶溶液:称取2.345g木瓜蛋白酶(活力单位≥600U/g)、1.175g淀粉酶(活力单位≥4000U/g)和1.000g酸性磷酸酶(活力单位≥4000U/g),用水定容至50mL。临用前配制。
4.12 标准溶液
4.12.1 维生素B2标准储备液(250μg/mL):称取25mg(精确至0.1mg)维生素B2标准品(4.5),加入盐酸(4.6)2mL,超声溶解后,立即用水转移并定容至100mL。置于棕色玻璃容器中在0℃～4℃冰箱贮存,保存期为3个月。
4.12.2 维生素B2标准中间液:准确吸取4.00mL标准储备液(4.12.1),用水稀释并定容至100mL,此溶液中维生素B2浓度为10μg/mL。临用前配制。
4.12.3 维生素B2标准系列工作液:分别吸取维生素B2标准中间液(4.12.2)0.00mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL、5.00mL、l0.00mL,用水溶解并定容至100mL。该标准系列浓度分别为0.00μg/mL、0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.20μg/mL、0.50μg/mL、1.00μg/mL。临用前配制。
5.仪器和设备
5.1 高效液相色谱仪,带有荧光检测器。
5.2 高压灭菌锅。
5.3 pH计:精度为0.01。
5.4 组织捣碎机。
5.5 0.45μm微孔水相滤膜。
5.6 天平:感量1mg和0.1mg。
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