细胞毒性检测主要是根据细胞膜通透性发生改变来进行的检测,常用以下几种方法:
.MTT,XTT法利用线粒体内部酶的活性,可以将特定的四唑盐类进行转化,然后通过酶标仪进行检测
.LDH(乳酸脱氢酶)的方法通过检测细胞培养上清中LDH的酶活性,来检测细胞毒性其它酶方法如检测上清中碱性磷酸酶、酸性磷酸酶的活性等
·细胞增殖能力分析试剂盒
原理:正常细胞代谢旺盛,其线粒体内的琥珀酸脱氢酶,可将四唑盐类物质(如MTT,XTT,WST-1等)还原为紫色的结晶状的物质,沉积在细胞周围,然后通过酶标仪读取OD值,从而检测到细胞增值状态
·荧光素发光法-细胞生存能力检测
原理:腺苷酸激酶(AK)存在于所有真核和原核细胞的胞浆中,AK(腺苷酸激酶)具有激活ADP(二磷酸腺音)生成ATP(三磷酸腺昔)。当细胞受损后,细胞膜发生破损,AK会释放到培养上清中。该试剂盒利用荧光素酶和荧光素在ATP作用下可以发光,通过化学发光仪可以定量进行检测.LDH法-细胞毒性检测
原理:LDH乳酸脱氢酶)是一种稳定的蛋白质,存在于正常细胞的胞质中,一旦细胞膜受损,LDH即被释放到细胞外;LDH催化乳酸形成丙酮酸盐,和INT(四唑盐类)反应形成紫色的结晶物质。通过检测细胞培养上清中LDH的活性,可判断细胞受损的程度
细胞毒性是化学物质(药物)作用于细胞基本结构和/或生理过程,如细胞膜或细胞骨架结构,细胞的新陈代谢过程,细胞组分或产物的合成、降解或释放,离子调控及细胞分裂等过程,导致细胞存活、增殖和/或功能的紊乱,所引发的不良反应。按作用机制可分3种类型:
@基本细胞毒性,涉及一种或多种上述结构或功能的改变,作用于所有类型的细胞;
②选择细胞毒性,存在于某些分化细胞上,主要通过化学物质的生物转化,与特殊受体结合或特殊的摄入机制所引发;
③细胞特殊功能毒性,对细胞结构和功能损伤轻微,但对整个机体损伤非常严重。
GB/T 15440-1995环境中有机污染物遗传毒性检测的样品前处理规范GB/T 27831-2011
化学品遗传毒性酿酒酵母菌基因突变试验方法B/T 27832-2011
化学品遗传毒性酿酒酵母菌有丝分裂重组试验方法ISO 10993-3-2014
医疗器械的生物评定第3部分遗传毒性、致癌力和生殖毒性试验GB/16886.3-2008医疗器械生物学评价
第3部分:遗传毒性、致癌性和生殖毒性试验SEN ISO 10993-3-2009医疗器械的生物评定遗传毒性、致癌性和生殖毒性试验
BS EN ISO 10993-3-2014医疗器械生物学评价3部分:测试的遗传毒性,致痘性和生殖毒性DIN EN ISO 10993-3-2009医疗器械生物学评价
第3部分遗传毒性、致癌性和生殖毒性试验DIN EN ISO 21427-2-2009水的质量通过微核诱变测量进行遗传毒性评估
第2部分利用V79细胞系的混合种群法