细胞增殖毒性检测,酶活性测定

百检网 2022-10-25

细胞毒性检测主要是根据细胞膜通透性发生改变来进行的检测,常用以下几种方法:

.MTT,XTT法利用线粒体内部酶的活性,可以将特定的四唑盐类进行转化,然后通过酶标仪进行检测

.LDH(乳酸脱氢酶)的方法通过检测细胞培养上清中LDH的酶活性,来检测细胞毒性其它酶方法如检测上清中碱性磷酸酶、酸性磷酸酶的活性等

·细胞增殖能力分析试剂盒

原理:正常细胞代谢旺盛,其线粒体内的琥珀酸脱氢酶,可将四唑盐类物质(如MTT,XTT,WST-1等)还原为紫色的结晶状的物质,沉积在细胞周围,然后通过酶标仪读取OD值,从而检测到细胞增值状态

·荧光素发光法-细胞生存能力检测

原理:腺苷酸激酶(AK)存在于所有真核和原核细胞的胞浆中,AK(腺苷酸激酶)具有激活ADP(二磷酸腺音)生成ATP(三磷酸腺昔)。当细胞受损后,细胞膜发生破损,AK会释放到培养上清中。该试剂盒利用荧光素酶和荧光素在ATP作用下可以发光,通过化学发光仪可以定量进行检测.LDH法-细胞毒性检测

原理:LDH乳酸脱氢酶)是一种稳定的蛋白质,存在于正常细胞的胞质中,一旦细胞膜受损,LDH即被释放到细胞外;LDH催化乳酸形成丙酮酸盐,和INT(四唑盐类)反应形成紫色的结晶物质。通过检测细胞培养上清中LDH的活性,可判断细胞受损的程度

细胞毒性是化学物质(药物)作用于细胞基本结构和/或生理过程,如细胞膜或细胞骨架结构,细胞的新陈代谢过程,细胞组分或产物的合成、降解或释放,离子调控及细胞分裂等过程,导致细胞存活、增殖和/或功能的紊乱,所引发的不良反应。按作用机制可分3种类型:

@基本细胞毒性,涉及一种或多种上述结构或功能的改变,作用于所有类型的细胞;

②选择细胞毒性,存在于某些分化细胞上,主要通过化学物质的生物转化,与特殊受体结合或特殊的摄入机制所引发;

③细胞特殊功能毒性,对细胞结构和功能损伤轻微,但对整个机体损伤非常严重。

GB/T 15440-1995环境中有机污染物遗传毒性检测的样品前处理规范GB/T 27831-2011

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第3部分:遗传毒性、致癌性和生殖毒性试验SEN ISO 10993-3-2009医疗器械的生物评定遗传毒性、致癌性和生殖毒性试验

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第3部分遗传毒性、致癌性和生殖毒性试验DIN EN ISO 21427-2-2009水的质量通过微核诱变测量进行遗传毒性评估

第2部分利用V79细胞系的混合种群法

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