Hsp90抑制剂（PF-04929113）检测

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培养操作步骤：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

鸭疫里氏杆菌Escherichia coli

仙台链霉菌Corynebacterium gultamicum

枯草芽孢杆菌Corynebacterium gultamicum

弗雷德里克斯堡假单胞菌Corynebacterium gultamicum

拟盘多毛孢Corynebacterium gultamicum

酿酒酵母Corynebacterium gultamicum

黑曲霉Corynebacterium gultamicum

青岛芽孢杆菌Corynebacterium gultamicum

枯草芽孢杆菌Corynebacterium gultamicum

褐球固氮菌Corynebacterium gultamicum

红斑黄菇Corynebacterium gultamicum

泡盛曲霉变种Corynebacterium gultamicum

亚利桑那沙门氏菌Corynebacterium gultamicum

榛色青霉Corynebacterium gultamicum

穗霉属Corynebacterium gultamicum

轮枝孢属Corynebacterium gultamicum

轴索过度生长抑制因子-A抗体Purpureocillium sp.帚状曲霉

腺样癌特异性相关抗原EMC1抗体澳大利亚糖丝菌匐枝青霉

猪蓝耳病GP5蛋白抗体大肠埃希氏菌DH5a/EcsecA N68帚枝菌

广谱细胞角蛋白PCK抗体大肠埃希氏菌DH5a/T/TBsecA2嗜硫杆菌
Hsp90抑制剂（PF-04929113）L-核糖

其他L(+)-核糖

英文名称：L-(+)-Ribose

产品规格：BR，98%

包装：1克/5克/25克

CAS号：24259-59-4

C5H10O5=150.13

级别：BR

含量：≥98.0%(HPLC)

熔点：81～82℃

比旋光度：18～22º（C=1，H2O）

性状：五碳糖(戊糖)中醛糖之一，与L(+)-来苏糖是光学异构体。属非天然物质，可从D-半乳糖钙(calcium-D-galactonate)氧化或用乳糖经γ射线辐照转化而成。稍溶于乙，在17℃时，一份样品可溶于38份无水乙中。密度(20℃)1.545g/cm3。消旋来苏糖(DL-lyxose)熔点95℃。熔点：108～112℃

用途：生化研究。

保存：RT

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，*后将1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，*后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。