如何精准选择色谱柱

百检网 2022-07-05

  现在市场上色谱柱种类繁多,不同类型的色谱柱分离对象不同,因此,必须学会精准选择液相色谱柱,在选择色谱柱之前一定的认识和了解色谱柱的一些基本知识。今天,我们就从分离模式选择、样品信息、色谱柱参数等方面与大家聊一聊如何精准选择液相色谱柱。
  分离模式
  液相色谱柱种类繁多,在精准选择液相色谱柱之前,**必须选择HPLC的分离模式,根据使用的固定相和流动相的组合不同,可以得到下列各种各样的分离模式。
  色谱柱参数
  色谱柱性能影响因素有很多,例如,硅胶纯度、色谱柱尺寸、颗粒形状、粒径、表面积、孔径,化学性质包括键合类型、碳覆盖率、封端,下面依次介绍各参数对色谱柱性能的影响,并根据以上参数精准地选择液相色谱柱。
  1、硅胶纯度
  硅胶纯度对强*性化合物的分离*为重要,残留金属离子浓度、硅胶的杂质会影响化合物的峰形,硅胶表面的金属含量高会影响碱性化合物的峰形,易发生拖尾。
  2、色谱柱尺寸
  增加色谱柱长度,可以在一定程度上提高柱效,但也会升高压力和导致峰展宽;含量测定、溶出检测等对于分离的要求较低,可选用较短的色谱柱,减少运行时间。内径大,提高载样量,但也会增加横向扩散,同样会导致峰展宽。内径小的色谱柱灵敏度较高,峰型更窄,但是载样量较小。如果载样量满足要求,需要更高更尖锐的峰提高灵敏度,可以选择更小内径,但压力较大,对系统要求较高。
  短柱(15-100mm)运行时间短、柱压低;
  长柱(150-250mm)分辨率高、运行时间长;
  小内径(≤2.1mm)检测器灵敏度高;
  大内径(3-21.2mm)载样量高、耐污染、寿命长。
  3、颗粒形状
  粒径球形颗粒柱效高、重现性好、柱床结构均匀,不规则形柱床结构不均匀、流动相线速度不均匀,容易谱带展宽;当使用粘度较大流动相时,球形颗粒可降低柱压,延长色谱柱寿命。
  4、粒径
  粒径指柱填料颗粒直径的大小,实际上色谱柱上所标的粒径是一个平均值,通常1.5-10μm。粒径小的色谱柱分离度较好,但色谱柱压力更大,如果5μm粒径的色谱柱分离度稍有不足,则同型号3μm色谱柱的分离度一般会提供令人满意的选择性。
  5、表面积
  表面积是指颗粒外表面与内部孔面积的总和,以m2/g表示,高表面积对于多组分样品的分离具有较强的保留能力、柱容量和分离度;表面积低的柱填料能迅速达到平衡状态,对于梯度洗脱尤为重要。
  6、孔径
  孔径是指填料颗粒的孔或腔的平均尺寸,范围是120~300?,多孔色谱填料与目标物的作用绝大部分(>95%)是发生在填料颗粒的内部,即孔内的,所以孔对于色谱填料也是*重要的参数之一,一款填料孔径大小(Pore Size)和孔径分布(Pore Size Distribution),在绝大多数的色谱分离纯化中,起到关键性作用。
  大孔径的填料颗粒可以延长大分子溶质在填料表面的滞留时间,达到充分分离,改善峰形,所以大孔径填料适合分离大分子化合物或者水动力体积较大的分子;较小孔径提供较高的表面积,可用于较大的载荷量,并保留小的有机化合物,可用于小分子有机物到聚合物的分离。
  样品分子直径小于平均孔径才能进入微粒内部,所选色谱柱孔径至少是样品流体学直径的4倍,一般根据样品的分子量选择适合的孔径。
  分子量<2000, 选择孔径80~180?
  分子量>2000,选择孔径300?,300?全多孔色谱柱可用于分离蛋白质和多肽。
  7、不同的载碳量
  载碳量越高,固定相传质效应增加,高载碳量,有利于不易保留化合物的分离,水解稳定性好,重现性好;低载碳量,有利于分析有一定保留的化合物,降低溶剂损耗、减少运行时间。
  8、封端
  硅胶键合相填料中有部分未封端的残留硅羟基,封端可以减轻待测组分与硅胶表面残留的酸性硅羟基反应,改善保留和峰形,这对于碱性化合物尤其重要。而不同的封端技术也会直接影响色谱柱的效能。
  百检网,不仅能帮助企业用户在线匹配适合的检测机构,促进产品质量提升,还能还能帮助优秀的检测机构提升品牌美誉度、获取检测订单,轻松实现互联网营销。
  百检网秉承“客户至上,服务为先,精诚合作,以人为本”的经营理念,我们为各行业有实力的检测机构提供终端用户在线自动选择下单的交易化平台,足不出户,即可与需求用户无缝对接。我们为终端检测用户群体,提供“一站购物式”的新奇检测体验,打开网站,像挑选商品一样简单,方便。
  百检网打造检验检测行业的头部社交媒体是我们的宗旨,让检测人、质量人每天即可获取到行业的*新政策、改革、标准和法规、机构动态、商机等信息,减少信息差,实现信息对等。
  百检网入驻的检测机构业务覆盖全检测行业。在线一对一服务。检测报告按时按质送到手,坐享报告配送服务:在百检平台上,客户从订购服务到提交委托信息到*后支付检测费用全都可以在线完成,不用出门就可以完成报检流程,报告按时按质送到手。

百检能给您带来哪些改变?

1、检测行业全覆盖,满足不同的检测;

2、实验室全覆盖,就近分配本地化检测;

3、工程师一对一服务,让检测更精准;

4、免费初检,初检不收取检测费用;

5、自助下单 快递免费上门取样;

6、周期短,费用低,服务周到;

7、拥有CMA、CNAS、CAL等权威资质;

8、检测报告权威有效、中国通用;

客户案例展示

  • 上海朗波王服饰有限公司
  • 浙江圣达生物药业股份有限公司
  • 天津市长庆电子科技有限公司
  • 上海纽特丝纺织品有限公司
  • 无锡露米娅纺织有限公司
  • 东方电气风电(凉山)有限公司