高效液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来，一些问题可通过改变设备参数解决，一些问题必须通过修改操作程序解决，而正确选择色谱柱和流动相是得到好的色谱图的关键。
一、常见故障及排除
1.基线漂移偏大
(1)柱温波动:控制好柱子和流动相的温度。
(2)流通池被污染或有气泡:用甲醇或其他强*性溶剂冲洗流通池。
(3)检测器出现阻塞，高压造成流通池窗口破裂，产生噪音基线:取出阻塞物或更换管子，更换流通池窗需参考检测器手册。
(4)柱平衡慢:特别是流动相发生变化时，用中等强度的溶剂冲洗，提前预约客户，在分析前用10～20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。
(5)流动相污染、变质或由低纯度溶液配成:使用高品质的化学试剂及高效液相色谱(HPLC)级的溶剂。
(6)样品中有强保留的物质(高K′值)以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升高的基线:使用保护柱，如有必要，在进样之间或在分析过程中，用强溶剂冲洗柱子。
(7)流动相不均匀、配比不当或流速有变化:在配制流动相时应充分摇匀，同时要根据目标分离物和流动相的*性合理配比，并保持流速恒定。
(8)柱子平衡时间短:HPLC色谱柱根据使用环境不同，平衡时间通常要控制在(30～60)min。
(9)检测器没有设定在*大吸收波长处:检测器没有设定在*大吸收波长处不仅影响检测器的灵敏度和结果的准确度，还会使基线漂移加大，应该将检测器设定在*大吸收波长处。
2.噪声偏大
(1)在流动相、检测器或泵中有空气:流动相脱气，并冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。
(2)管路漏液:检查管路接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。
(3)流动相污染、变质或有低纯度溶液配制:使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂。
(4)温度差异影响(柱温过高，检测器未加热):减少差异或加上热交换器。
(5)在同一条线上有其他电子设备:断开LC、检测器和记录仪，检查干扰是否来自于外部，加以更正。
(6)检测器/ 记录仪电子元件的问题:断开检测器和记录仪的电源，检查并更正。
(7)泵震动:在系统中加入脉冲阻尼器。
(8)检测器灯能量不足:更换灯。
(9)色谱柱填料流失或阻塞:更换色谱柱。
3.重复性偏大
(1)峰型不佳(如峰拖尾、峰宽较大、分裂峰等都不利于峰面积的计算，造成重复性偏大):可以改变色谱柱条件，改变温度、流速等参数，以获得较尖锐的峰型，利于保证积分的准确性。
(2)泵流速不稳:可以根据泵流速检定情况作出判断，泵流速的稳定性对峰面积的重复性影响非常大。例如:在其他条件不变的情况下，将流速由1.0mL/min改为0.5mL/min，结果保留时间加倍，峰面积也加倍，也可以看出峰面积在一定条件下基本与流速成反比。
(3)色谱柱影响:色谱柱固定相的流失，以及色谱柱对标样的吸收等都会影响检测结果；特殊情况下还会发生柱子对样品的不可逆吸收，建议使用替代柱。
(4)柱温有变化:柱温对保留时间有显著影响，保留时间的变化直接影响积分面积的大小。因此应保持柱温恒定。
(5)进样器漏液:进样器漏液导致进入色谱柱的样品量发生变化，进而导致峰面积发生变化，应检查进样垫等易损部件以排除漏液。
(6)样品本身的影响:样品降解或溶剂挥发都会导致重复性偏大，应确定方法的准确性和采取措施控制挥发。
二、液相色谱仪的检定技巧
在检定中，有可能工作量比较大，时间比较长。如进一次样，等待样品出峰可能需要10min以上，而按照检定规程要求，至少要进6次样，如此一项做下来，可能就需要一两个小时。这就要求检定人员必须提高工作效率，合理安排工作时间。如在检定员下厂前*好预约客户，通知其预热仪器，有的还需要预先冲洗色谱柱，因为根据企业检测样品不同，仪器色谱柱内往往残留各种杂质，给检定带来不确定因素。如果到了现场再冲洗，更换流动相，等仪器稳定下来，有可能要半天的时间。这里提供两个检定技巧供参考。
一是自备替代柱(*好选用符合规程、对标物保留时间较短的色谱柱)。
二是连续进样。对于连续进样，出于定性分析的要求，还应当配备一个秒表，记录并计算各次进样的保留时间(操作方法:**要选用可以连续记录6次以上的秒表，在**次进样时，便用秒表与工作站同步计时，然后记录各个后续进样的时间，再与工作站出峰时间依次对应，计算保留时间)。但是，一定要保证计时准确，否则会影响定性重复性指标的判断。
作者：魏惠萍
