在正常人的血、尿、脑脊液、胸膜液、心包液及腹膜液中，均无细菌存在。细菌对抗生素敏感试验有一下三种方式。
(1) 扩散法 琼脂加上细菌所需要的各种养料，将培养基融化后，倒入无菌培养皿中，冷却，凝成一个平面或叫平板(平皿)。这时将含有少数细菌的菌液涂到平板上，培养后细菌就会分别在平皿上裂殖，如果在平皿的培养基内事先加入抗生素纸片，由于药物在培养基中扩散，起了抑(杀)菌作用，形成了不长菌落的抑制圈。抑制圈的大小，反映某一抗生素对该菌抑菌的程度。
(2) 稀释法 常用药敏稀释法可分试管稀释法、琼脂稀释法两种：
① 试管稀释法 先将测试抗菌药物作一系列倍比稀释，然后各试管加入适当稀释的试验菌液，摇匀，经培养后观察，以抗菌药物*小抑菌浓度(MiC)管，即为试验菌株的敏感度。
② 琼脂稀释法 将不同剂量的抗菌药物，分别加于融化并冷至45℃的定量琼脂培养基中，混匀，倾注成无菌平板，即为含有药物浓度递减的培养基，接种测试菌于该培养基上，经培养后观察，被检菌生长情况，*低药物抑制细菌生长者，即*小抑菌浓度(Mic)。
(3) 自动分析法 国内采用AUTOBAC仪器作细菌药敏测定，仪器由测定环药物低片，培养振荡机及光度计主机等来检定数据，按耐药、中等耐药、敏感，并把*小抑菌浓度都打印出来。该仪器仅适用于测定需氧菌及兼性厌氧菌，不适于专性厌氧菌及结核分枝杆菌的测试。
