溶解在流动相中的氧气,会导致样品中某些组分被氧化或会使柱中固定相发生降解而改变的分离柱能;还会造成荧光猝灭,影响荧光检测器的检测。在低死体积检测池中,存在气泡会增加基线噪声,严重时会造成分析灵敏度下降,而无法进行分析。因此为除去流动相中溶解的气体,防止在洗脱过程中当流动相由色谱柱流至检测器时,因压力降低而产生气泡,在使用前必须进行脱气处理。 还有几种离线脱气操作方法,其应用会随流动相存放时间的延长又会有空气重新溶解到流动相中。抽真空脱气法适用于单一溶剂体系脱气。使用水泵连接抽滤瓶和微孔玻璃漏斗可一起完成过滤机械杂质和脱气的双重任务。使用微型真空泵,降压后即可除去溶解的气体。抽真空会引起混合溶剂组成的变化,每种溶剂应预先脱气后再进行混合,以保证混合后的比例不变。 超声波脱气法的脱气效果不是很理想,是将欲脱气的流动相置于超声波清洗器中,用超声波振荡。吹氦脱气法适用于所有的溶剂,脱气效果较好,但在国内因氦气价格较贵,本法使用较少。
液相色谱仪常用的脱气方法有很多种。其中加热回流法的脱气效果较好。另外,在线真空脱气技术实现了流动相在进入输液泵前的连续真空脱气,把真空脱气装置串接到储液系统中,并结合膜过滤器。这种脱气效果适用于多元溶剂体系。