分光光度计是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器,允许吸光值在一定范围内变化。样品的吸光值与样品的浓度成正比,有一定的准确度和精确度。常用于蛋白、细菌生长浓度以及核酸的定量。 蛋白质通常是多种蛋白质的化合物。 比色法测定的基础是蛋白质构成成分与外加的显色基团或者染料反应,产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反应的氨基酸数目直接相关,从而反应蛋白质浓度。蛋白质直接定量方法,适合检测较纯净、成分相对单一的蛋白质。测定过程非常简单,先测试空白液,然后直接测试蛋白质。由于缓冲液中存在一些杂质,一般要将其消除。紫外直接定量法相对于比色法来说,速度快,操作简单;但是敏感度低,要求蛋白的浓度较高;也容易受到平行物质的干扰。 对于要求较高的细菌生长密度和生长期实验中,采用分光光度计准确测定细菌细胞密度是追踪液体培养物中微生物生长的标准方法。 核酸的定量在测试前,应选择正确的程序,输入原液和稀释液的体积,测试空白液和样品液。定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数。测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度。核酸的定量是分光光度计使用频率较高的功能。