发光剂是指在发光反响中介入能量转移并以发射光子的情势产生能量的化合物,依据发光特色分为化学发光剂、生物发光剂和荧光素3种。物资由电子激起态到基态,产生的能量称为发光,表示为光的发射。依据构成激起态份子的激起能可将发光分为:化学发光、生物发光和光照发光。 电化学发光剂是指在电*外面举行电化学反响而收回光的物资。电子供体3丙胺和3联吡啶钌在阳性电*外面成为强氧化剂,可将2价变成3价,丢失1个电子产生氧化反响。电子失去后被氧化成阳离子自由基,可自觉地丢失质子,成为很强的复原剂,很不稳固。可将1个高能量的电子递给3价的使其构成激起态的2价。激起态的3联吡啶钌不稳固,很快发射出1个光子,到基态的3联吡啶钌。这个进程可在电*外面循环往复地举行,发生很多光子。 直接化学发光剂只需转变溶液的pH值等前提就可以发光的物资,不需酶的催化感化。如吖啶酯在有过氧化氢的稀碱溶液中即能发光。 经常使用的酶发光剂有酶促反响的发光底物。是指经酶的降解感化而收回光的发光底物,化学发光酶免疫技巧中经常使用的酶有碱性磷酸酶和辣根过氧化物酶。为对-羟基苯乙酸和鲁米诺或其衍生物以及4-(2-螺旋金刚烷⑷-甲氧基⑷-甲基⑷-(4-磷酸氧基)-苯基⑴,2-2氧乙烷和4-甲基伞形酮磷酸盐。对-羟基苯乙酸可用荧光光度计丈量。鲁米诺的氧化反响在碱性缓冲液中举行,平日以缓冲液作底物液。要留意是:起首,鲁米诺和H2O2在无HRP催化时也能迟缓自觉发光,而在末了光强度测定中形成空缺滋扰,因此宜分离配制成2瓶试剂溶液,只在用前混杂;其次, 如邻-碘酚试剂或荧光素酶可加强催化鲁米诺氧化的反响和延伸发光时光,进步发光敏感度。