有没有觉得新的移液器每次打枪头的声音特别像吃鸡游戏里M24狙击枪的开枪声--清脆舒服。但如果你还使劲在枪头盒子上敲几下来插上枪头,就赶紧收手吧,不然你的M24很快就要变成散弹枪了。。。。。。因为长时间这样做会导致枪的内部配件(如弹簧)因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散,甚至会导致刻度调节旋钮卡住甚至会将枪弹射套筒折断。
正确的做法应该是:将枪垂直插入枪头中,稍微用力左右微微转动1/4或1/2圈即可使其紧密结合。多道(如8道或12道,有钱人家)的移液枪,可将移液枪的**道对准**个枪头,然后倾斜地插入,往前后方向摇动即可卡紧。枪头卡紧的标志是略微超过O型环,并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。
从大到小,按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可;从小到大,则先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度(继续旋转活塞按钮约1/3圈),再回调至设定体积,这样可以保证量取的*高精确度(伟大而博学的导师教我的)。在该过程中,不要将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。通常,移液器推荐在35-****量程范围内操作。
不知道大家有没有遇到过这种情况,枪头明明插紧了,手上的操作明明是缓慢进行,但还是会肉眼可见的抽取液体的体积不够,排除人为操作失误(也就是说,你真的不会用枪),还要注意是否进行了润洗。除了普通液体润洗以外,在吸取有机溶剂或高挥发性液体时,挥发性气体会在白套筒室内形成负压,从而产生漏液的情况,这时就需要预洗4~6次,让白套筒室内的气体达到饱和,负压就会自动消失。注:高温或者低温(冰点以下)液体请不要润洗。
讲了这么多,重点来了,移液器不就是为了移液嘛
1)移液浸入的角度:保持垂直状态,*多不能超过20°。倾斜吸液会造成气压面的改变,增大移液误差。
2)枪头浸入深度:枪头正确的浸入深度可以有效的减少取液误差。
3)吸液速度:匀速。过快的吸液速度,容易使样品形成漩涡,产生气泡;样品液易进入套柄,对活塞和密封圈造成损伤,除了损伤移液器,这一点也很容易造成污染,细胞间曾因为这种操作失误,让正常的细胞株里混入了肿瘤细胞。。。。。。特别是1ml以上的液体,很容易造成液体上冲。吸完后*好能在液面内停留1-3秒。
4)排液及吹液:
排液:将活塞按压至**档;
吹液:继续下压活塞按钮,到达第二档或者直接按到底。(大家应该理解我说的**档和第二档是什么意思,但是我有点质疑导师讲的这一点到底对不对,因为我之前的排液和吸液完全是反着的啊。。。。。。)
5)移液器使用完毕,必须卸掉枪头后才可以挂在实验台上,以防止任何残留的液体都会在平放时倒流回吸液杆。
一个物件的使用寿命,总的来说,6分靠正确的使用方法,4分就要靠正确的保养了,所以请佛系用枪。
1)如果移液器每天都需要使用,则建议每三个月或半年清洁并校准一次。
2)如较长时间不使用,要把移液枪的量程调至*大值的刻度,使弹簧处于松弛状态以保护弹簧,不注意此点容易导致活塞无法回弹。
3)如液体不小心进入活塞室需及时清除污染物(这是公德心!)。
4)在吸取过高挥发、高腐蚀液体后,应将整支移液器拆开,用蒸馏水冲洗活塞杆及白套筒内壁,并在晾干后安装使用,以免挥发性气体长时间吸附于活塞杆表面,对活塞杆产生腐蚀,损坏移液器。
留的液体都会在平放时倒流回吸液杆。
(1)当我们碰到吸取粘稠液体的时候,该怎么办?
日常实验中,我们偶尔会吸取高粘稠的液体,比如说TWEEN-20,或者是高粘度的蛋白,在用枪吸取的时候,常常会感觉液体吸取的很慢,打出的时候又很容易残留液体,吹不干净,还容易一不小心吸到枪里。这里给大家介绍两种方式:
1、无论枪头的体积是适用于多少,枪头口都很细小,这也是造成粘稠液体难以吹打的原因之一。所以我们可以用剪子把枪头的尖口处剪掉,然后再去吸取粘稠液体;
2、我们可以在枪的第二个卡顿点处时吸液,在**个卡顿点处吹出液体。这样做就可以弥补挂在枪头处的部分液体;
3、如果实验室有条件的话,可以使用外置活塞式移液器,也就是油枪,小编也只是听说过,并没有见过。但是这种移液器不但可以准确地吸出高粘度液体,还可以移取容易起泡的液体,很牛逼的样子。
(2)加少量的液体时,总是有一点很难打出,怎么办?
有时候在配制大体积液体,遇到这种情况,也就马马虎虎的糊弄过去了,但是在做PCR实验加样时,本身每一步加的量就很少,再有一点残存在枪头里,误差就太大了。遇到这种情况,解决的方法如下:
1、使用进口枪头(高品质、超低吸附);
2、你可能要检查一下自己的移液器了,它的密封性可能出了问题;
3、请你的老板买一个“油枪”给你。
(3)吸取液体时,总会有气泡,怎么办?
这一点小编也很奇怪,吸取大体积的液体时很少遇到这种情况,但是吸取的液体体积越小,越容易出现气泡的情况,尤其是在PCR加样时,一般这种情况的原因有很多,对症下药就好了:
1、可能是你的枪头和枪并没有接触严密;
2、没有将枪插到液面下面,所以你在吸取液体的时候自然而然就会吸进去空气;
3、加样速度太快,没有吸满液体就把枪拿出来;
4、SDS这类的表面活性剂很容易气泡。
(4)如果不小心把液体吸进枪里,该怎么办?
这就是所谓的倒吸,是用枪的大忌。如果不小心吸进去了液体,一定要及时清理,不然会使枪体生锈、腐蚀影响精准度、如果实验室里有用废的枪,可以那它练手,学着拆卸移液器,这样出现问题的时候,可以自己修理。
(5)学会如何自检移液器
1、可以分别检测一把移液器的*大量程、50%的量程和10%的量程吸取的液体的质量,每个量程测三次,取平均值;
2、根据当时的环境温度,将三个平均值分别乘以水的密度系数,这样就可以得到相应的体积,应用的就是初中学到的密度=质量/体积的公式;
3、之后就可以把计算出的体积和枪的精准度比较了。