通常来说,水源的污染物有以下几方面的因素:
1、水源被污染也可能消毒不彻底导致细菌残留;
2、二次供水管理不当,造成水源的微生物污染;
3、医疗用水制备环节、日常管理不规范等导致微生物超标;
4、供水系统、管道网络等工程长期未维护,管道渗透,导致微生物污染;
5、水路设计不合理,或某处供水区域长期停用,导致该处的水长期滞留,细菌沉积,对供水系统造成微生物指标超标;
6、医务人员使用不当,比如在和患者使用的水共用水池,可能会造成出水口处污染等。
那么,常规微生物检测采样需注意哪些呢?
1、对于医疗用水微生物采样计划与安排,应提前做好全年计划,制定医疗用水采样、送检、保存等相关的标准化操作程序;
2、采样宜使用无菌瓶、无菌注射器等采样器具;
3、样品登记表,内容包括采样日期、编码、科室、地点、水样类别、剂量、采样人等相关信息;
4、采取管道的水样,需做好个人防护,做好卫生,对出水口进行消毒,放水时间不低于1min,拧开无菌瓶收集水样;桶装水取样时,可采用无菌注射器,以无菌操作的方式抽取水样,注入无菌蓝口瓶;采集水样的剂量要大于实验室所需剂量;可采取二人配合方式采样,避免二次污染;
5、送检时间不超过4h,若未能及时检测,应保存在0℃-4℃环境中,但也不能超过24h。
医疗用水微生物检测方法有哪些?
1、在洁净实验室或生物安全柜内,通过无菌的操作方法用灭菌吸管吸取1mL充分混匀的水样,注入无菌平皿中,倒入约15mL已融化并冷却至45℃左右的营养琼脂培养基,同时立即旋摇平皿,让水样与培养基充分混合。每个送检的水样应同时培育2个试样,做平行平皿的接种。若是整批水样检测时,还要另用一块无菌平皿,只倾注培养基,不接种样品,作为空白对照。
2、等平皿冷却后,翻转平皿,使底面朝上,放置于36℃±1℃保温箱中,培养48h后进行菌落计数。2块平皿应分别计数,相加后除以2,即为该水样1mL中的菌落总数。
如果其中一个平皿有较大片状菌落生长时,则不宜采用。应以无片状菌落的平皿作为该水样的平均菌落数。如果片状菌落不到平皿50%的面积,但其余的菌落分布均匀,则可将平皿一分为二,计数菌落均匀分布的一边,计数后乘以2,就代表了该平皿上的菌落总数。
3、先选择平均菌落数在30~300之间的平皿计数。计数两块平皿菌落数的平均数,再将平均数乘以相应稀释倍数,得到每毫升中的菌落总数。
如果平皿菌落密布时,不宜以“无法计数”作为结果报告。可任意计数其中2块平皿中1cm2的菌落数,再除以2求出每平方厘米内平均菌落数,*后乘以平皿底部面积63.6 cm2,即得出该水样1mL中的菌落总数。
4、菌落计数的报告,当菌落数在100以内时,按实数报告,大于100时,保留两位有效数字,在两位有效数字后面的数值,以四舍五入方法计数。为了书写方便,也可用10的指数来表示。
如果2块平皿均未见细菌生长,则以小于1CFU/mL表示。若空白对照上有菌落生长,则此次检测结果无效。
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