氨基酸态氮,指的是以氨基酸形式存在的氮元素的含量,是判定发酵产品发酵程度的特性指标。该指标之所以不达标,或由于生产工艺不符合标准要求,或产品配方缺陷,或产品与已制定指标不匹配等原因造成。该指标越高,说明酱油中氨基酸含量越高,鲜味越好。酿造酱油通过氨基酸态氮含量可区别其等级,每百毫升的氨基酸态氮所含克数含量越高,品质越好。一般来说,特级、一级、二级、三级酱油的氨基酸态氮含量分别为≥0.8、≥0.7、≥0.55、≥0.4g/100ml。
氨基酸态氮的执行标准有《酿造酱油》(GB/T 18186—2000)、《配制酱油》(SB/T 10336—2012)、产品明示标准及质量要求。
氨基酸态氮的测定——酸度滴定法
1.原理
根据氨基酸的两性作用,加入甲醛以固定氨基的碱性,使羧基显示出酸性。用氢氧化钠标准溶液滴定,以酸度计定终点。 —COOH被完全中和时,pH值约为8.5~9.5。本法准确快速,可用于各类样品游离氨基酸含量测定。
2.仪器
①酸度计。
②磁力搅拌器。
③微量滴定管(10 mL)。
3.试剂
①36%甲醛溶液。
②0.05mol·L-1氢氧化钠标准溶液,标定后使用。
4.操作步骤
①确吸取5.O mL液体样品,置于100 mL容量瓶中,加水至刻度,混匀。
②吸取20.0 mL上述样品稀释液于200 mL烧杯中,加水60 mL,开动磁力搅拌器,用O.05 mol·L-1NaOH标准溶液滴定至酸度计指示为pH=8.2(记下消耗氢氧化钠溶液的体积,可用于计算总酸含量)。
③加入10.O mL甲醛溶液,混匀。再用0.05 mol·L-1叫NaOH标准溶液继续滴定至pH=9.2,记录消耗标准溶液的体积(V1)。
取80 mL水,在同样条件下做试剂空白试验,记录消耗标准溶液的体积(V0)。
5.计算
X=[c×(V1﹣V0)×0.014] ÷[5×(V/100)×100
式中:X——样品中氨基酸态氮的质量分数,%;
V1——样品稀释液在加入甲醛后滴定至终点(pH=9.2)所消耗氢氧化钠标准溶液的体积;
V0——空白试验加入甲醛后滴定至终点所消耗氢氧化钠标准溶液的体积;
V——滴定时吸取样品稀释液体积,mL;
c——氢氧化钠标准溶液浓度,mol·L-1。
5——测定用液体样品毫升数。
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