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将指数生长期的细胞暴露在细胞毒性药物中，暴露的持续时间通常决定于产生*大损伤所需的时间，但是它也受药物稳定性的影响。将药物撤除后，让细胞再增殖 2~3 个群体倍增时间（PDT )，这样就可以把能够增殖的存活细胞与那些不能增殖的存活细胞区別开来。然后用 MTT 染料还原反应测定存活细胞的数目。只要 MTT—甲臜产物溶于适当溶剂中，就可以用分光光度法来定量。
先将不同浓度的药物加入到微滴定板上培养的单层细胞中温育（图 22.5), 撤去药物，每日换液至 2~3 个 PDT , 然后再次更换培养液并在每个孔中加入 MTT。于暗处温育 4 h ，然后撤除培养基和 MTT 。将不溶于水的 MTT—甲臜结晶溶于 DMSO 中，加人缓冲液调节*终的 pH , 在 ELISA 读板仪上记录吸光值.