植物酶可以提高动物的消化功能，催化机体内的生化反应，促进机体的新陈代谢，从而弥补因应激等原因消化酶分泌的减少。所以很多时候，类似植酸酶、蛋白酶、纤维素酶、脂肪酶、果胶酶、淀粉酶等植物酶制剂会被作为很好的饲料添加剂，应用在饲料产品的生产加工里面。这时候，如果企业能够准确的把握酶活性、酶反应的相关数据就能够更好的设计一款符合市场需求的畜禽饲料。
一、方法原理分析
使用分光光度法检测植酸酶活性，原理主要是利用植酸酶在一定温度和 pH 条件下，可以水解底物植酸钠，从而生成正磷酸和肌醇衍生物，只要在酸性溶液中，用钒钼酸氨处理，就会生成黄色的【( NH4) 3PO 4 NH 4 VO 3 · 16M O O 3 】复合物，然后我们用分光光度计，在波长 415nm 下进行比色测定就可以了解其酶活性。
二、检测方法步骤
1.取有代表性样品， 用四分法将试样缩分至200g， 植酸酶产品不需粉碎， 配合饲料和添加剂预混合饲料需粉碎通过0.45mm标准筛,装入密封容器,防止试样成分变化。
2.称取样品5000U/g的0.4~0.6g，精确至0.0001g，置于250mL三角瓶中，准确加入100mL乙酸缓冲液(2)，放到空气浴摇床上振荡30min或磁力搅拌器上高速搅拌30min，在离心机上以4000r/min离心10min。分取不同体积的上清液用乙酸缓冲液(2)稀释，使样液浓度保持在0.4U/mL左右，待反应。建议精确移取上清液1mL至25mL容量瓶中，用乙酸缓冲液(2)定容，摇匀。再继续精确移取1mL试液至25mL容量瓶中，定容，摇匀，稀释至31250倍。
3.取10mL试管，精确移取2mL稀释液至试管中，同时做试样空白。将样品放入37℃水浴锅预热5min，先将空白加4mL终止液(1.3.7)，再将样与空白依次加入4mL底物植酸钠(1.3.3)，从加底物开始，向每支试管中加入试剂的时间间隔要**一致，加液后立即混匀，将其放入37℃水浴水解30min;取出后将样品各加入4mL终止液。
4.反应后的试样在室温下静置10min，如出现混浊需在离心机(1.4.7)上以4000转/min离心10min，上清液以标准曲线的空白调零在分光光度计415nm波长处测定样品空白(A0)和样品溶液(A)的吸光值，A-A0为实测吸光值，用直线回归方程计算植酸酶的活性。
三、酶反应分析
1.酶反应的*适温度
酶反应的*适温度调节恒温水浴锅，在不同温度下(15~70℃)进行酶促反应。以*高酶活为****，其他条件下的酶活占*高酶活的百分数即为该酶在此温度条件的相对酶活。植酸酶作为一种酶制剂，对温度非常敏感，温度低会降低它的生物活性;温度高也会降低其生物活性，甚至完全失活。植酸酶随着温度的增加，酶活呈上升趋势，到55℃左右酶活达到*高，温度超过55℃后酶活开始下降，通过检测，该酶的*适反应温度为55℃。
2.酶反应的*适pH值
配制0.1mol的乙酸-乙酸钠缓冲溶液，在不同的pH值((1.0~7.0)下进行酶促反应。以*高酶活为****，其他条件下的酶活占*高酶活的百分数即为该酶在此pH条件的相对酶活。通过检测可知，植酸酶的*适pH值在4.0左右。pH值在2.5~5.5.能保持70%以上的酶活，该酶有较宽的pH适宜范围，可以在消化道内充分发挥作用。
3.底物浓度对酶活的影响
配制不同反应浓度(0.1~5.0mmol/L)的底物，在常规条件下测定酶活，以*高酶活为****，在其他条件下的酶活，占*高酶活的百分数即为该酶在此底物浓度下的相对酶活。随着底物浓度的增加酶活逐渐上升，当底物浓度足够大时，酶全部被底物所饱和，此时反应速度达到*大值。随着底物浓度的增加，样品空白的本底值逐渐增大，会影响酶活的测定。
四、总结
通过分光光度计法检测，我们可以了解到该酶制剂样品的*适反应温度为 55℃;*适反应pH值为4.0.酶活的测定在饲料用酶制剂产品的质量检验、产品标签和酶活保证方面是必不可少的项目， 而酶活的测定是一种非常细致的工作，所以，我们一定要找准依据标准，深刻理解影响酶制剂酶活测定的主要因素，正确把握各影响因素的关键点，从而才能为企业筛选优质酶制剂、确定复合酶制剂的*佳组方及确定产品的*佳添加量等提供更好的数据支撑。
