食品微生物菌落总数怎么检测?目前对于食品微生物菌落总数有对应的检测方法标准依据。今天百检网就给大家介绍一下食品微生物菌落总数的测定方法相关信息。
检测方法标准依据：GB 4789.2-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定
1.范围
本标准规定了食品中菌落总数( Aerobic plate count)的测定方法。
本标准适用于食品中菌落总数的测定
2.术语和定义
菌落总数 aerobic plate count
食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。
3.设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下：
3.1 恒温培养箱:36℃±1℃,30℃±1℃
3.2 冰箱:2℃～5℃
3.3 恒温水浴箱:46℃±1℃。
3.4 天平:感量为0.1g。
3.5 均质器。
3.6 振荡器。
3.7 无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头。
3.8 无菌锥形瓶:容量250mL、500mI。
3.9 无菌培养皿:直径90mm。
3.10 pH计或pH比色管或精密pH试纸。
3.11 放大镜或/和菌落计数器。
4.培养基和试剂
4.1 平板计数琼脂培养基:见A.1。
4.2 磷酸盐缓冲液:见A.2。
4.3 无菌生理盐水:见A.3。
5.检验程序
菌落总数的检验程序见图1
6.操作步骤
6.1 样品的稀释
6.1. 1 固体和半固体样品:称取25g样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内,8000r/min~10000r/min均质1min~2min,或放入盛有225mL稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1min~2min,制成1:10的样品匀液。
6.1.2 液体样品:以无菌吸管吸取25mL样品置盛有225mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成1:10的样品匀液。
6.1.3 用lmL无菌吸管或微量移液器吸取Ⅰ:10样品匀液ⅠmL,沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头**不要触及稀释液面),振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成1:100的样品匀液。
6.1.4 按6.1.3操作,制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用1次1mL无菌吸管或吸头。
6.1.5 根据对样品污染状况的估计,选择2个~3个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),在进行10倍递增稀释时,吸取1mL样品匀液于无菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。同时,分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。
6.1.6 及时将15mL～20mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养基(可放置于46℃±1℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀。
6.2 培养
6.2.1 待琼脂凝固后,将平板翻转,36℃±1培养48h±2h。水产品30℃±1℃培养72h±3h。
6.2.2 如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时,可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基(约4mL),凝固后翻转平板,按6.2.1条件进行培养。
6.3 菌落计数
6.3.1 可用肉眼观察,必要时用放大镜或菌落计数器,记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位( colony- forming units,CFU)表示。
6.3.2 选取菌落数在30CFU～300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30CFU的平板记录具体菌落数,大于300CFU的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。
6.3.3 其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数;若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以2,代表一个平板菌落数。
6.3.4 当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时,则将每条单链作为一个菌落计数。
………………
关于食品微生物菌落总数检测测定方法相关信息就介绍到这里。做检测，上百检，百检网为您带来一站式检测服务。
