无菌检测常见问题答疑汇总

Q哪些属于无菌药品呢？

无菌药品种类繁多。胃肠外用药或注射制剂，例如单克隆抗体和疫苗，静脉注射制剂是公认的无菌药品。还有其他无菌药物，例如眼科制剂（滴眼液）、医用植入物、缝线和外科敷料等。

Q通常会如何检测这些无菌药物的无菌性呢？

有两种公认的方法。一种是薄膜过滤法，另一种是直接接种法。在直接接种法中，将一定量的每种产品直接转移到两种生长培养基中，以培养潜在的活微生物。生长培养基可以培养需氧和厌氧活微生物。在薄膜过滤法中，使用两个容器对一定量的无菌产品进行过滤，每个容器都装有一个膜过滤器，用以捕获潜在的活微生物。然后向容器中填充生长培养基，并在所需培养温度下孵育。

美国药典章节USP<71>，欧洲药典2.6.1以及其他相关章节都明确规定“只要产品性质允许，就必须使用薄膜过滤法”。

Q膜过滤法的优势有哪些？

膜过滤有助于对大体积样品实施检测，消除或至少能够减少具有抗菌特性的化合物的存在，并且可确保缓慢生长微生物的恢复。通过以保持生长为基础，该方法还可确保仅检测到活微生物，且结果可靠。这避免了对背景或噪声的过度关注，从而减少这些因素导致的误报。

Q产品过滤后会经历什么流程？

将装有生长培养基的容器置于培养箱中，并在14天内定期检查微生物的生长情况。引入 14 天的培养期是为了确保缓慢生长的微生物（如痤疮丙酸杆菌）的可培养性。药品可能会为潜在的污染微生物创造一个不友好的环境，导致其生长恢复滞后。建立 14 天的培养期则是为了确保这种潜伏滞后形式有效恢复。

Q无菌检测有什么快速方法吗？

针对保质期短的产品应用了快速检测方法，这类产品包括先进治疗，或细胞和基因疗法，以及PET中使用的放射性示踪剂。基于ATP生物发光、二氧化碳检测和核酸扩增的快速方法现在正被用于对这种保质期短的产品进行检测。

对于传统无菌药物，将传统检测与快速方法相结合。产品过滤后，在容器中填充生长培养基，培养 5 - 6 天。然后，通过隔膜端口无菌抽取样本，在容器中存放并转移到Celsis平台进行测试。这缩短了培养期和放行周期。然而，该方法仍然依赖于膜过滤和微生物培养。

无菌检测章节中规定了每批次需检测的体积和容器数量。例如，根据*终体积，从 2 %或 20 个容器（以较小者为准）中抽取一个固定体积，对一批 500 个容器进行无菌检测。因此，还需进一步讨论传统方法或快速方法获得的无菌检测结果是否具有统计学可靠性。在EU-GMP附件1等指南的帮助下，该行业通过改进生产标准开发了其他确保无菌性的方法。在可预见的将来，无菌检测仍然是用于监测可能的严重污染的一项重要检查项目。

Q是否存在抗菌物质时出现假阳性结果的情况呢？如果在无菌检测期间引入污染，会发生什么情况？

如果检测到无菌检测失败，则会启动彻底的根本原因分析。对流程的每一步重新检查，以确定失败原因。在重复检测之前，必须执行纠正措施。如果样品不合格，则整个批次都视为被污染，且必须销毁该批次。为了避免这种耗时且成本高昂的延迟放行，在受控环境中进行的无菌检测，这与无菌生产中采用的环境类似。近年来，越来越多的人采用隔离器等屏障技术进行无菌检测。