霉菌和酵母菌总数是指化妆品检样在一定条件下培养后,1g或1mL化妆品中所污染的活的霉菌和酵母菌菌落总数,籍以判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。
本方法根据霉菌和酵母菌特有的形态和培养特性,在虎红培养基上,置28℃培养72h,计算所生长的霉菌和酵母菌数。
操作步骤
1、将无菌棉试子蘸取无菌生理盐水,在每只拖鞋鞋面与脚趾接触处5cm×5cm面积上,有顺序地均匀涂抹3次(一双鞋鞋为一份样品)后,用灭菌剪刀将棉试子手执部分剪断,将棉试子放入10mL装有玻璃珠的无菌盐水管中。
2、将盛有棉试子的盐水管在手心用力震荡100次,再用带橡皮乳头的1mL灭菌吸管反复吹吸50次,使霉孢子充分散开。此液为1:10稀释液。
3、用灭菌吸管吸取1:10检液2ML,分别注入到2个灭菌平皿内,每皿1ML。令取1ML注入9ML加有玻璃珠的灭菌盐水管中,换一支1ML灭菌吸管吸吹5次,此液1:100稀释液。
4、按上述操作顺序作10倍稀释,每稀释一次,换一支1ML灭菌吸管,根据样品的污染情况,选择3个合适的稀释度。
5、将溶化并冷却至45℃左右的培养基注入灭菌的平皿中,待琼脂凝固后,倒置于25~28 ℃温箱中,3天后开始观察,共培养观察一周。