GB/T22035-2008乳及乳制品中植物油的检验气相检测-百检网

1范围

本标准规定了用气相色谱法检验乳及乳制品中植物油的方法。

本标准适用于乳及乳制品中植物油的定性检验。

2.规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的*新版本。凡是不注日期的引用文件,其*新版本适用于本标准。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法(GB/T 6682-1992,neq ISO 3696:1987)

3.原理

样品经过氢氧化钾乙醇溶液皂化,用乙醚、石油醚萃取脂肪,通过蒸馏或蒸发去除溶剂,用正己烷萃取游离的甾醇,用气相色谱分析。若所测样品中含有β-谷甾醇,则确定其中含有植物油成分。

4.试剂与材料

所有的试剂如未注明规格,均为分析纯;实验用水如未注明,均应符合GB/T 6682的规定。

4.1 正己烷(C5H6):色谱纯。

4.2 乙醇(C2H5OH):95%。

4.3 乙醚[(C2H5)2O]。

4.4 石油醚:沸程为30℃～60℃。

4.5 无水硫酸钠(Na2SO4)。

4.6 氢氧化钾溶液:500g/L。

称取500g氢氧化钾(KOH),溶解后转移至1000mL容量瓶中,定容,混匀。

4.7 胆固醇和β-谷甾醇混和标准溶液:每毫升含各单组分甾醇为0.4mg。

分别精确称取胆固醇和β-谷甾醇标准品10mg,用正己烷(4.1)溶解并定容到同一25mL容量瓶中。摇匀后,冷藏于冰箱中,有效期60d。

5.仪器和设备

实验室常用仪器及以下各项。

5.1 气相色谱仪:配备氢火焰离子化检测器(FID)。

5.2 分析天平(感量0.01g)。

5.3 分析天平(感量0.1mg)。

5.4 旋转蒸发器。

5.5 磨口锥形瓶:250mL,可以连接空气冷凝管。

6.试样制备

6.1 液态试样

称量20g样品,精确至0.01g,置于磨口锥形瓶(5.5)中。

6.2 固态试样

称量1g～5g样品,精确至0.01g,置于磨口锥形瓶(5.5)中,加入50℃温水10mL溶解。

注:根据样品中的脂肪含量调整称取样量,使试样中脂肪含量不低于1g。

7.分析步骤

7.1 试液制备

上述盛有试样(第6章)的磨口锥形瓶(5.5)中,加入25mL氢氧化钾溶液(4.6)及25mL乙醇(4.2),摇匀,加入4粒～5粒玻璃珠,装上冷凝管,85℃水浴回流皂化45min。皂化液冷却至室温后,转入250mL分液漏斗中,用少量水洗锥形瓶(5.5),洗液并入皂化液中。

分液漏斗中加入25mL乙醚(4.3)和25mL石油醚(4.4),轻轻振摇约1min,静止分层。水相再用25mL乙醚(4.3)分别萃取两次,合并萃取液。多次用25mL水洗萃取液至pH为中性,经无水硫酸钠(4.5)脱水,过滤,收集滤液于蒸馏瓶中。40℃左右,用旋转蒸发器(5.4)将萃取液蒸至近干,用正己烷(4.1)溶解残渣,转移定容至10mL,用于气相色谱仪(5.1)测定。

7.2 气相色谱參考条件

气相色谱柱:DB-5毛细管柱,30m×0.25mm×0.25μm;

检测器温度:325℃;

进样口温度:280℃;

柱温:程序升温,自200℃起,以15℃/min升温至300℃,保持20min;

氮气流速:1.0mL/min;

氢气流速:30mL/min;

空气流速:300mL/min;

分流比:5:1;

进样量:2μL。

7.3 测定

准确吸取2μL胆固醇和β-谷甾醇的混合标准工作液(4.7),注入气相色谱仪(5.1)。在上述色谱条件下,出峰顺序依次为胆固醇和β-谷甾醇,标准溶液的气相色谱图参见图A.1。