逆向工程

逆向工程

逆向工程研究是通过对原研药进行逆向分析，得知辅料的含量及制备工艺等关键性指标，是一个科学的、经济的、高效的仿制药研发手段。

 

剖析处方成分

 

一般可在FDA、PMDA、EMA、eMC等官方网站中查找原研药的处方。

 

分离技术

 

排除其他辅料的干扰，根据干扰成分的数目及其物理化学性质选择分离技术，如：溶解性、过滤（与一个特定的孔径和截留分子量的过滤器），高效液相色谱法（HPLC）、高效薄层层析（HPTLC），和分子排阻色谱法等。

 

 定量检测

1、重量法/沉淀法：重量法测定不溶性辅料用量，如常用辅料中的微晶纤维素、硬脂酸镁、微粉硅胶等为水不溶性辅料

2、元素分析方法：用元素分析法可以精准的定量含金属元素辅料的含量

 

分析方法	辅料名称
ICP-OES	硬脂酸镁、羧甲基淀粉钠、羧甲基纤维素钠、磷酸氢钙、十二烷基硫酸钠、滑石粉 二氧化硅、羧甲基纤维素钙、硬脂酸钙
AAS/ICP

3、离子色谱法：离子色谱法经常检测的常见离子的含量。

分析方法	辅料名称
阴离子色谱	F-, Cl-, Br-, NO2-, PO43-, NO3-, SO42-，乳酸、甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸、异戊酸、苹果酸、柠檬酸、柠檬酸盐、醋酸盐、乳酸
阳离子色谱	Li+、Na+、NH4+、K+、Mg2+、Ca2+

4、常规色谱法：已开发相应分析方法。

分析方法	辅料名称
凝胶色谱	吐温80
HPLC-ELSD	甘露醇、山梨醇、蔗糖、乳糖
UV、碘量法	玉米淀粉、预交化淀粉
GC	硬脂酸、羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素或乙基纤维
HPLC	甘露醇、聚维酮、柠檬酸、柠檬酸三乙酯、乳酸盐、丁基羟基茴香醚、乳酸盐、二丁基 羟基甲苯

 

API的理化性质(分子水平研究)

API的分子水平研究包括晶型、水合物、溶剂化物、无定形态，这些可能会影响到溶解度、生产可行性、生物利用度和稳定性等问题。目前监测方法有多种，如X射线粉末衍射(XRPD)、核磁共振(NMR)、Roman谱和近红外(NIR)谱、熔点测定法、电子显微镜法、差示扫描热量法(DSC)、密度法等。