病毒杀灭试验的实验方法:以生活饮用水和人工游泳池水消毒为例

百检网 2021-11-02
消毒是预防与控制病毒传播、流行的有效方法,目前使用较为普遍的消毒方法就是使用消毒剂。为了取得较好的消毒效果,在众多的消毒剂中通过试验选择出效果好的消毒剂显得尤为重要。而消毒剂的病毒杀灭效果是通过病毒灭杀试验检测得来的,各类消毒剂的病毒灭杀效果检测方式也有所不同,下文主要以检测生活饮用水和人工游泳池水的消毒剂与消毒器械的消毒效果为例,以验证其对生活饮用水消毒能否达到卫生合格标准。

 
病毒杀灭试验的试验器材
(1)大肠杆菌(8099)悬液。取37℃培养18h~24 h的新鲜大肠杆菌斜面,用生理盐水洗下菌苔,混匀后再用生理盐水适当稀释,配制成试验用大肠杆菌悬液。
(2)微孔滤膜滤器和滤膜(滤膜孔径为 0.45um~0.65 um,滤膜大小示滤器型号确定,目前常用有直径为35 mm和 47 mm 两种)。
(3)抽滤水泵或气泵。
(4)恒温水浴箱。
(5)秒表。
(6)三角烧瓶。
(7)广口玻璃瓶(500ml)。
(8)无齿镊子。
(9)品红亚硫酸钠培养基。
(10)中和剂。
(11)细菌定量杀灭试验用其他器材。
(12)天然水样。
(13)模拟现场消毒装置。
(14)磁力搅拌器。

病毒杀灭试验的试验阶段
饮用水消毒效果的鉴定应经过实验室杀菌试验,天然水样消毒试验两个阶段的检测。实验室试验的目的是以大肠杆菌为试验菌,用悬液定量杀菌试验法测出在试管中消毒所需的剂量。天然水样消毒试验是由自然水体取样,进一步验证受试消毒剂或方法对成分较复杂的天然水的消毒效果。对用于较大水体(如人工游泳池水、高层建筑二次供水)消毒的设备和方法,必要时尚需进行模拟现场或现场试验,以进一步验证其消毒效果。
由于生活饮用水的卫生标准,除微生物外还需考虑化学污染等方面,因此对其安全评价尚需由有关专业单位对其他条件,例如化学物质含量和 pH值等,进行检测和判定,以对所鉴定的消毒剂或器械做出合格与否的综合评价。

病毒灭杀试验:实验室操作程序
1)试验分组:分为试验组、阳性对照组、阴性对照组;
2)操作程序:先配制试验菌污染水样,再将装有试验菌污染水样的三角烧瓶放入恒温水浴箱(20℃±2℃)中,开动磁力搅拌器,使细菌在水中分布均匀。先取2份试验菌污染水样,进行大肠杆菌活菌计数(阳性对照组)。待水样的温度恒定后加入消毒剂,迅速搅拌均匀。从开始加消毒剂起计时,按规定时间吸取水样,注入装有中和剂的无菌三角烧瓶中,以终止消毒作用。将中和后水样,分别取 100 ml,10 ml,1 ml各2份,进行大肠杆菌的活菌培养计数。将未接种大肠杆菌的试验用同批培养基平板2个,置温箱中培养(阴性对照组)。试验重复3次。
3)结果评价:当阳性对照组平均菌量在5x 104 cfu/100 ml~5 x 105 cfu/100 ml,阴性对照组均无菌生长时。在3次试验中均使大肠杆菌下降至0/100 ml的*低剂量,可判定为实验室试验中饮水消毒*低有效剂量。若阳性对照和阴性对照未达上述要求,应寻找原因,纠正后重做试验。

病毒灭杀试验:人工游泳池水消毒效果鉴定
1)水样采集。游泳池水面≤1000 m²,设2个采样点,超过1000m²的,设3个采样点。
2)鉴定时应在暑季游泳人员处于高峰期时进行。室内游泳池可根据情况在其他季节进行,但亦应在游泳人员的高峰期。
3)采样时,使用无菌玻璃瓶在水面下 30 cm 深处采集。再将水样加入有适量鉴定合格的中和剂溶液的无菌玻璃瓶中。每点采1个样本。每日采2次,一次在清晨消毒前(作为阳性对照),一次在消毒后当日游泳人员高峰时,作为消毒后样本。
4)试验剂量选用说明书规定者。对样本,应检测细菌总数和大肠菌群数。使用含氯消毒剂时,还应测定水中的剩余氯含量。检测方法按《公共场所卫生标准监测检验方法》中的规定进行。
5)消毒后样本检测结果,细菌总数应≤1000cfu/ml,大肠菌群≤18cfu/L(见游泳场所卫生标准))。
6)检测按日重复5 次。5次全部符合上述要求者可判为合格。
 
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