1 范围
本标准规定了用分光光度法测定红参中总糖(以葡萄糖计)的含量。
本标准适用于红参中总糖含量的测定。
本标准方法的线性范围为0.012mg~1.8mg。
本标准方法的定量限为1.2%。
2 规范性引用文件
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GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 原理
试样中水溶性糖和水不溶性多糖经盐酸水解后转化成还原糖，与3，5-二硝基水杨酸共热后被还原成棕红色的氨基化合物在波长520m处测定吸光度，吸光度值与还原糖含量成正比。
4 试剂和材料
除非另有说明，均使用分析纯试剂，水为GB/T 6682 规定的三级水。
4.1 10%盐酸溶液：取27mL盐酸加水稀释至100mL。
4.2 10%氢氧化钠溶液：称取100g氢氧化钠加水溶解并稀释至1000mL。
4.3 30%氢氧化钠溶液：称取30g氢氧化钠加水溶解并稀释至100mL。
4.4 1%3，5-二硝基水杨酸溶液：称取10g3，5-二硝基水杨酸，加水溶解并稀释至1000mL。
4.5 显色剂(DNS试剂)
a) 甲液：称取6.9g结晶苯酚溶于15.2mL氢氧化钠溶液(4.2)中，并稀释至69mL，在此液中加入6.9g亚硫酸氢钠，溶解即得。
b) 乙液：称取255g酒石酸钾钠，加入300mL氢氧化钠溶液(4.2)中，溶解后，再加入880mL3，5-二硝基水杨酸溶液(4.4)中，混匀即得。
将甲液与乙液混合摇匀，贮于棕色试剂瓶中，在室温下放置7d后方可使用(4℃冰箱冷藏，保质期6个月)。
4.6 葡萄糖标准品(C6H12O6)：含量大于99.5%。
4.7 葡萄糖标准溶液[(C6H12O6)=lmg/mL]：准确称取葡萄糖标准品10mg，加少量水溶解并稀释定容至10mL，摇匀，备用(现用现配)。
4.8 碘化钾一碘溶液：称取1g碘和10g碘化钾溶于50mL水中，再加2mL冰乙酸，加水稀释至100mL。
4.9 0.1%酚酞指示剂：称取0.1g酚酞，加95%乙醇溶解并稀释至100mL。
4.10 D101型大孔吸附树脂。
5 仪器和设备
5.1分光光度计。
5.2 分析天平：感量±0.0001g。
5.3 分析天平：感量±0.01g。
5.4 恒温水浴锅。
5.5 涡旋振荡器。
5.6 粉碎机：配备0.25mm孔径的金属筛网。
6 分析步骤
6.1 试样制备
取代表性样品约100g，用粉碎机粉碎至通过0.25mm孔径筛，装人样品瓶中备用。
6.2 试样前处理
称取1g试样(精确到0.1mg)，置50ml具塞刻度试管中，用量筒加入25mL盐酸溶液(4.1)，沸水浴中加热20min后，用碘化钾_碘溶液(4.8)检査水解程度(取1滴水解液于白瓷板上，加人1滴碘化钾—碘溶液，若不显蓝色，则已水解完全；如显蓝色，则未水解完全，继续水解，每2min检査一次水解程度，直至不显蓝色)。水解完全冷却后将其全部转移至100mL锥形瓶中，加人0.5mL酚酞指示剂(4.9)，用氢氧化钠溶液(4.3)中和至溶液呈红色，加入5gD101型大孔吸附树脂(4.10)，在涡旋振荡器上振荡50min后过滤，加水定容至100mL再准确吸取10.0mL上述溶液置100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液为试样测试液。
6.3 标准曲线的制定
分别吸取0mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL和1.4mL的葡萄糖标准溶液(4.7)至25mL的具塞刻度试管中，此标准溶液葡萄糖含量相当于0mg、0.2mg、0.4mg、0.6mg、0.8mg、1.0mg、1.2mg和1.4mg，加水至2mL，加入2 ML DNS试剂(4.5)，然后将试管放入沸水浴中加热6min，立即在冰水中冷却后，转移至25mL容量瓶中，定容摇匀，用分光光度计在波长520nm处测定吸光度，以葡萄糖含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
6.4 测定
准确吸取1mL待测液(6.2)于25mL的具塞刻度试管中，按6.3条“加水至2mL”以下步骤操作，以空白溶液调零，分别测定吸光度值，根据回归方程计算相应的糖含量。
6.5 空白试验
除不加试样外，其余操作步骤同试样溶液测定。
7 结果计算
试料中总糖(以葡萄糖计)含量ω以质量分数(%)表示，按式(1)计算。
ω=（m1×V×f×10-3）/(m*V1)
式中：
m1——根据标准曲线计算的葡萄糖含量，单位为毫克(mg)；
V——试样的定容体积，单位为毫升(mL)；
V1——比色测定时移取试样待测液的体积，单位为毫升(mL)；
f——试样的稀释倍数；
m——试料的质量，单位为克(g)。
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