黄曲霉毒素M1和铅是乳品质量安全中重要的安全指标，也是生鲜乳质量安全监管和风险评估研究中重点关注的风险因子，检测数据的准确性和科学性直接影响对牛乳的品质和安全性的判定和评估。能力验证是利用实验室间比对来确定实验室能力的活动，也是为确保实验室维持较高的校准和检测水平而对其能力进行考核、监督和确认的一种验证活动，通过能力验证活动可以检验实验室检检测水平和能力，是评价、判断、监控和提升实验室能力的有效手段之一。
一、牛乳中黄曲霉毒素M1的测定
1.奶产品中黄曲霉毒素M1的限量我国GB 2761-2011 《食品安全国家标准 食品中真菌毒素的限量》中明确规定牛乳中黄曲霉毒素M1的限量为0.5µg/kg，与美国、日本一致，欧盟成员国以及与欧盟有贸易部分国家相对严格，为0.05µg/kg，而欧盟对婴幼儿配方食品，包括婴幼儿配方牛奶则限量0.025µg/kg。
2.黄曲霉毒素M1的检测方法 目前现有黄曲霉毒素M1检测方法有薄层色谱法、酶联免疫法、荧光光度法、液相色谱法、液质联用法等。我国现行有效的标准有GB 5413.37-2010《食品安全国家标准 乳和乳制品中黄曲霉毒素M1的测定》、GB 5009.24-2010《食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素M1和B1的测定》、GB/T 23212-2008《牛奶和奶粉中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2的测定 液相色谱-荧光检测法》、SN/T 1664-2005 《牛奶和奶粉中黄曲霉毒素M1、B1、B2、G1、G2含量的测定》等。牛乳中黄曲霉毒素M1的测定主要推荐使用GB 5413.37-2010中的**法(液质联用免疫亲和层析净化法)和第二法(高效液相色谱免疫亲和层析净化法)。这两种方法都适用，但从日常检测经验来看，液相法定量方面优于液质法，且操作相对简单、仪器普及率高，牛乳中黄曲霉毒素M1的测定推荐使用第二法。
3.液相色谱免疫亲和柱净化法1)样品前处理
A准确称样:牛乳取50 mL(g)以上,奶粉称取10 g左右，取样量一定按照标准要求操作。
B复原：奶粉需用50℃温水50 mL复溶，完全溶解，不能有结块，冷却至室温后定容至100 mL。
C离心去脂：样液在4 ℃下以10000转/min转速下冷冻离心15 min，完全去除脂肪，吸取清液，操作过程中不得混入脂肪。
D净化、浓缩：应注意冷藏保存的免疫亲和柱需恢复至室温，并检查柱效，柱效应大于80 %，且上样过程中免疫亲和柱不能流干;流速一般控制在2-3mL/min;水洗后需抽干，用3mL甲醇洗脱收集，氮气吹至近干，用10%乙腈水溶液定容至1mL。
2)色谱条件
色谱柱： C18 4.6×150mm,3.5-5Micron 。
流动相：乙腈-水(25：75)
流速： 0.8ml/min 。
进样量：30.0 uL。
柱温：25℃。
检测器：荧光检测器;
激发波长365nm，发射波长435nm;
图1黄曲霉毒素M1标样图谱
图2 牛乳样品中黄曲霉毒素M1图谱
3)能力验证中注意事项
样品贮存：拿到能力验证考试样后，如果不马上做应放入冰箱4°C保存;
标准物质：应使用有证标准物质，biopure(ROMER)、色谱科(SUPELCO)等有证标准溶液都可以，贮备液用乙腈配置，工作液标样直接用流动相配制;
洗脱步骤：免疫亲和柱的使用按照各厂家说明书操作。洗脱液一般使用色谱纯的试剂。
样品质控：1)添加回收;2)实物标样;
取样：离心后取清液时，注意不要将离心后的脂肪层混入。
浓缩：注意氮吹的流量和温度，氮气流量不可太大。
阳性样本：日常检测中留意保留阳性样本，作为质控参考。
二、牛乳中铅的测定
1.我国牛乳中铅的限量要求GB 2762-2012《食品安全国家标准 食品中污染物限量》中明确规定铅含量不得超过0.05mg/kg。
2、铅的检测方法目前现有铅的检测方法有石墨炉原子吸收光谱法、氢化物原子荧光光谱法、火焰原子吸收光谱法、二硫腙比色法、单扫描*谱法等。现行有效的标准主要为GB 5009.12-2010《食品安全国家标准食品中铅的测定》，牛乳中铅的测定主要推荐使用GB 5009.12-2010中的**法(石墨炉原子吸收光谱法)和第二法(氢化物原子荧光光谱法)，从日常检测经验来看，**法更适用于测定牛乳中的铅。
3、牛乳中铅的测定操作注意事项1)空白试验
铅的测定过程中需做试剂空白实验，为了有效控制试剂空白处于较低水平，对测定结果不产生不良影响，一般需要注意两个方面：
器皿的清洗——实验过程中需要用到的所有器皿都应在(1+5)的硝酸中浸泡过夜，用水反复冲洗，*后用去离子水冲洗干净后方可投入使用。
试剂纯度及水的要求——测定过程中使用的水应为GB/T6682规定的一级水，使用的硝酸、高氯酸应为优级纯或以上，并对所使用的酸作为关键性试剂进行验收。
