微藻藻种的分离筛选技术

百检网 2021-12-27
    培养微藻,**要从天然海水中分离出所需要的“单种”或“克隆”,如果在培养过程中,一旦发生杂藻污染或遭到虫害。必须重新进行藻种的分离,以保证藻种具备“单种”或“克降”的特性。
  微藻培养者根据各自的经验和习惯,创造了各式各样的藻种分离筛选方法,已有十几种之多。*常用的方法是微细吸管法、小水滴法和琼脂平板法。
  微细吸管法*常用,是取得“单种”或“克隆”的*可靠的方法之一。但操作技术要求高,在显微镜下,先用猪眼睑毛做成的解剖针,将水滴中杂物和不需要的藻细胞,拨向一边,将所需的藻细胞拨向另一边;对于有趋光性的鞭毛藻,可在一侧投入光线,则所要选的鞭毛藻游向有光一侧,杂质留在原处,这样用玻璃微细吸管吸取所需的藻细胞就比较容易,另外,对个体较大的种类,可在双筒解剖镜下操作,将微细吸管内的藻细胞轻轻吹入浅凹栽玻片上或栽玻片上的水滴中,为达到纯培养,微藻细胞*好经数次洗涤,即吹入另一滴之后,再吸出吹入另一滴灭菌培养液水滴中,反复称出洗涤几次,*后经镜检确认水滴中是要筛选的一个藻细胞之后,再接种试管中,或将含有藻细胞的一段毛细管用消毒镊子夹断,放入接种试管中。
  小水滴法比较方便易行,先将24乘24毫米的盖玻片,用割针剂安瓿的小砂轮分割成8乘8毫米的9小块,洗净晾干,装在培养皿中,干燥灭菌,把这些小块玻片排列在灭菌的栽玻片上,在每块小玻片上,滴一小滴含有微藻的水样,水滴的大小,以在显微镜低倍镜下能看清水滴的全部或大部分,稍稍移动显微镜的栽物台,就能看清整个小水滴为度,发现小水滴中只有一个所要分离的藻细胞,无其他生物混杂时,就可用消毒镊子,将该玻片夹起来,放进装有培养液的小试管中进行培养。如果不是为了得到“克隆”,水滴中只要是同一种藻细胞,2-3个细胞成链也行,这样更易使所需要的藻类迅速生长繁殖起来。
  琼脂平板法对分离能运动的羽纹硅藻类、鞭毛型绿藻类*为适宜,方法易于掌握。这又可分为划线接种法、喷雾接种法和小水滴扩散法。现仅举小水滴扩散法为例。在制成的1-1.5%琼脂,加热搅拌,稍冷后分装于培养皿中,厚3-5毫米,经高压灭菌,放冷)上,稀疏地滴上一些水样小滴,放入培养箱中或北窗口下培养,当小淼贮存器的藻类随水滴的扩散和藻类自身的运动,分散成单个个体,在某些方面平板的某一部位形成藻落,在显微镜下检查确认后,用消毒过的玻璃微针取下所需藻落,放入试管中培养,反复几次,就能得到纯种培养物。





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