百检网资讯:干扰素是构成我们自然防御系统重要组成部分的蛋白质。这些蛋白质还表现出显着的抗病毒活性。重组人干扰素α2b(rhIFNα2b)于1986年获得美国食品和药物管理局的批准。此后,它一直被用作治疗乙型肝炎和丙型肝炎的抗病毒药物。问题:rhIFNα2b的检测繁琐且耗时。
在此背景下,来自中国的研究人员*近在一项新研究中开发了一种快速有效检测rhIFNα2b的新方法。该论文于2021年7月8日在线发布,并于2022年4月30日发表在《药物分析杂志》上。
为了开发他们的新方法,他们将一种新型纳米体固定在纸条上。这种方法中使用的纳米抗体*初来自羊驼——一种南美骆驼科哺乳动物。随后,它在研究实验室中使用重组DNA技术生成——一种用于亚克隆DNA片段以获得大量合成蛋白质的技术。这通常使用细菌或其他原核细胞来实现。纳米抗体是较大抗体的功能片段。由于固定化的新型纳米抗体与rhIFNα2b紧密结合并具有高特异性,因此可用于快速、可靠地检测rhIFNα2b。
据王俊志博士介绍,“由于纳米抗体在试剂保存、生产和成本方面的优势,使用纳米抗体的侧流免疫层析检测具有取代传统的基于抗体的配体结合检测的巨大潜力,用于快速识别检测重组蛋白疗法。”
研究小组使用Octet平台表征了I22-rhIFNα2b相互作用的结合,即纳米抗体122和rhIFNα2b之间的结合。获得的数据清楚地表明紧密结合。使用蛋白质印迹进一步验证了结合特异性,蛋白质印迹是一种使用蛋白质特异性抗体检测蛋白质的技术。
“目前在中国上市的rhIFNα2b产品包括注射剂、粉针剂、凝胶剂和糊剂。免疫层析试纸条只能用于评估液体或粉末形式的可溶解并应用于试纸条的产品。这是因为产品需要通过毛细作用沿条带扩散;凝胶和糊剂不能满足这一要求,”王博士解释说。
非常有趣的是,开发的rhIFNa2b检测方法的检测限为1?g/mL,低于现有限值。这使其成为一种更灵敏的基于实验室的快速鉴定rhIFNα2b的技术。另一个很大的优势是使用纳米抗体进行蛋白质检测。这是因为可以通过收获廉价的细菌细胞以经济的方式获得纳米抗体。此外,使用常规使用的实验室技术可以相对容易地获得大量纳米抗体。
王博士说:“通过我们的测试,rhIFNα2b鉴定的操作时间从两天缩短到了几分钟,可以满足市场上对重组蛋白产品家族的快速检测需求,为我们提供了一个很好的解决方案。”为提高市场假冒检测效率奠定基础,未来可全面开展快速检测。
综上所述,新开发的方法可以为更顺畅、更快、更准确地检测重组或人工产生的蛋白质铺平道路,为肝炎的早期诊断和治疗奠定基础。