冰淇淋中磷酸酶怎么检测?目前对于冰淇淋中磷酸酶有对应的检测方法标准依据。今天百检网就给大家介绍一下冰淇淋中磷酸酶的测定方法相关信息。
检测步骤：
步骤1——分取1.0ml样品放入2个或3个试管中(1个试管作为对照或空白，*好有两个以上试管进行平行测定)(山羊奶用3ml样品)。
步骤2——在沸水的带盖的烧杯中加热空白约1min(整个试管温度必须在85—95℃)，冷却到室温。逐个同样处理空白和试样。
步骤3——加10.0mlBa缓冲基质 (b)(1)或 (2)，塞紧试管，混合 (pH10.0±0.15)。(这个基质对鲜奶，甜脱脂酸奶或干酪乳浆是很满意的。对于长时间或轻微发酸的牛奶，使用由未稀释的缓冲溶液(a)(1)制备的基质;对于巧克力饮料，用由1/4体积水稀释的缓冲液制备的基质;对于很酸(pH<4.5)的脱脂酸奶，由26—11缓冲液18-128A(a)(2)制备基质;而对于山羊奶，由27—11缓冲液A(a)(2)制备基质。
对未知样品的定量结果，调节pH到l0.0—10.05。
步骤4——加入基质后，立即在37—38℃水浴上培养1h，不时地混合或摇动。
步骤5——在沸水烧杯中加热约1min(试管中物质的温度应达到85—90℃，在另一个同样大小和形状含有同样体积液体的试管中用温度计测定)。在冷水容器中冷却到室温。
步骤6——对于鲜奶，甜脱脂酸奶或干酪乳浆，移取1.0mlZn—Cu蛋白质沉淀剂(C)。(对于长时间的或轻微发酸的牛奶或酸化脱脂酸奶，以1.0m16.0%的ZnSO4·7H2O溶液代替;对巧克力饮料，用1.0ml含4.5gZnSO4·7H2O和0.1gCuSO4·5H2O/100ml溶液;而对山羊奶，用1.0m1含7.5gZnSO4·7H2O和0.1gCuSO4·5H2O/100ml的溶液)充分混合 (混合物的pH应为9.0—9.1)。
步骤7——过滤(5cm漏斗，9cmWhatman42号或2号滤纸，或相当的)并把5.0ml滤液收集在试管中，*好用刻度在5.0和10.0ml的试管。
步骤8——加5.0ml发色缓冲液 (a)(2)(混合物的pH应为9.3—9.4)。
步骤9——加4滴BQC溶液(d)混合，在室温发色30min(对只检验不足的巴氏灭菌，仅加2滴BQC溶液)。
步骤10——用下列方法之一测定蓝色的强度:
(a)用光度计——读空白和试液的颜色强度(使用具有*大T的大约610nm的滤光片)，从试样读数中减去空白的读数，参考标准曲线 (g)(2)，把结果转化为酚当量。[使用光度计时，一般不必用BuOH萃取;如果按(b)中进行BuOH萃取，离心5min破坏乳胶体并除去悬浮在乙醇层中的水。(Babcock离心瓶对这个目的是适用的用如下制作专用的试管架:从适当直径的橡胶塞上切下6mm厚，装进离心杯的底部，把2个适当直径的软木塞粘在一起，通过中心打一个适当大小的洞，以便固定试管，把一对软木塞插入杯中。)离心后，用顶部带橡皮球的移液管，除去几乎全部BuOH。渗入光度计池中，用具有*大T约650nm滤光片读数]。
(b)用目视标准——对于产生大于5个颜色单位的样品，将试管中的颜色与酚标准水溶液 (g)(2)的颜色比较。对于边界情况的定量结果 (即试样产生0.5—5颜色单位)，用BuOH(f)萃取。加5.0mlBuOH并慢慢颠倒试管几次;如果必须提高乙醇层的清晰度，可按 (a)中离心，与经同样处理的酚标准液 (g)(2)的颜色比较。
步骤11——发色中，观察到强烈的阳性试验中(即≥20单位)，用4滴BQC可能不足以与所有酚结合，移取适量部分到另一管中用稀发色缓冲液(a)(3)稀释到10.0ml，再加2滴的BQC溶液。对于每个试验都稀释而且同样处理空白。如果稀样品试验仍是很强的阳性，再用同样方法稀释直到*终颜色在目视标样或光度标样曲线范围之内。在*后一次加入BQC后，进行*后读数前，使其发色30min。为校正稀溶液的读数，对于5+5稀溶液乘以2，对于1+9稀溶液乘以10，对于2+8稀释后又1+9稀释溶液乘以50，等等。
步骤12——用1.0ml样品加11.0ml试剂(总液体12.0ml，用5.0ml滤液)时:用读数值乘以1.2转变为酚当量/0.5ml样品。(如果愿意也可以乘2.4将结果变为酚当量/1ml样品)在鲜奶、巧克力饮料、脱脂酸奶和奶酪乳浆中，酚当量大于2/0.5ml表明消毒不够，山羊奶中酚量大于1/1.5ml表明消毒不足。
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