现有的测定马来酸和富马酸的方法主要有电位滴定法、分光光度法、离子交换色谱法及高效液相色谱法等。其中高效液楣色谱法分析有机酸具有简便快速、选择性好、准确度高等优点。
近年来测定马来酸和富马酸的文献主要针对标准品、废水、发酵液、葡萄酒及果汁等较简单的介质，而对淀粉及相关食品中马来酸和富马酸提取及同时测定的方法尚未见报道。本文采用l％氨水一甲醇(1:1)对淀粉、粉丝、粉条、鱼丸、生湿面制品等9类食品进行提取，采用反相高效液相色谱法进行分析测定，结果稳定、可靠。
1 实验部分
1.1仪器与试剂
Waters 2695型高效液相色谱仪，配有二*管阵列检测器及Empower色谱数据处理系统(美国waters公司)；KQ5200超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；3-18K型高速离心机(*高转速lO000r/min，德国sigIIla公司)，Milli-Q纯水系统(美国Miuipore公司)。
马来酸、富马酸标准物质(德国Dr．Ehrenstofer公司)；甲醇(色谱纯，美国Fisher公司)；磷酸二氢铵(上海试剂二厂)、氨水(淄博化工试剂厂)均为分析纯；磷酸(优级纯，天津市科密欧化学试剂有限公司)；超纯水由美国Milli-Q纯水系统制备；微孔滤膜(有机系，0.45um)。
1.2 标准溶液的制备
分别精确称取马来酸、富马酸50 mg于50 mL容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，充分摇匀后备用。此溶液于4℃冰箱中可储存3个月。将上述各标准储备溶液用水配制成0.2、1.0、2.0、5.0、lO.0、50.Oug/ml的混合系列标准溶液，使用前配制。
1.3 样品前处理
称取2.5g样品于25mL比色管中，加入10mL l％氨水-甲醇(1:1)溶液，漩涡混合2min，超声提取20min。取出放至室温后用水定容至刻度，充分混匀，7500r/min离心5min。经O.45um有机微孔滤膜过滤后进样测定。
2 色谱条件
色谱柱：色谱柱(4.6 mm×250 mm，5um)；流动相：0.03 moL/L NH4H2P04(用磷酸调至pH 2.45)；流速1.0mL/min；进样体积10uL；柱温30℃；检测波长210nm。
3 定量方法
由于马来酸酐遇水即生成马来酸，在提取后实际测得的目标物为马来酸，故本方法以马来酸为标准品采用外标法定量，淀粉及相关食品中的马来酸和马来酸酐总含量以马来酸计。淀粉及相关食品中富马酸的含量也采用外标法定量。
