牛奶中抗生素的检测

一、 牛奶中抗生素的种类

β-内酰胺类

属于此类的抗生素的有青霉素类和头孢霉素类，常用于奶牛等家畜的个体临床治疗，残留在牛乳中。

四环素类

常见种类有四环素、金霉素、土霉素、强力霉素等，是一类广谱抗生素。

氨基糖苷类

常见种类有庆大霉素、链霉素、二氢链霉素、新霉素、壮观霉素等，是常用于家畜的氨基糖苷类抗生素。

氯霉素类

包括以下三种化合物：氯霉素，甲砜霉素，氟甲砜霉素。这类药物都是严格限制使用的兽药，有些国家禁止使用。

大环内酯类

常见种类有红霉素、秦乐霉素、林可霉素、螺旋霉素和盐霉素等。

磺胺类

常见种类有磺胺二甲嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺甲嘧啶、磺胺嘧啶等，甲氧苄啶是磺胺增效剂，不单独使用。

二、抗生素残留的危害

抗生素的残留对人体的健康、生态平衡、奶制品价格及奶制品的国际贸易均有不同程度的危害

三、牛奶中抗生素检测方法

1.传统的微生物检测法

微生物检测法出现较早，从出现至今，大大改善了我国抗生素检测手段的发展，其测定原理是基于抗生素对微生物的生理机能、代谢具有一定的抑制效果，与临床应用保持一致，相对而言，其耗费的时间久，且存在着较大的误差，目前*常应用的是TTC法、戴尔沃检测(DelvotestSP)法、BY法等。

2.国际通用的检测法

相对而言，其是国际上应用较早的通用测定方法，也是我国制定的监测方法，其原理是：如果牛奶中含有抗生素，则加入菌种(嗜热链球菌)经培育2.5-3h后，加入TTC指示剂(三苯基四氮唑)不发生还原反应，所以样品呈无色状态。如果牛奶中不含抗生素，则样品呈红色。相对而言，这一方法费用较低，但是耗时，因此应用不算太广，发展受到一定的限制。

3.戴尔沃检测法

该方法出现在荷兰，其原理主要是利用一种微生物叫嗜热芽胞菌，其在64℃条件下培养2.5——3h后会产酸，酸引起指示剂BCP(溴甲酚紫)变为黄色;若牛奶样品中不含抗生素，培养后样品呈黄色，如样品中含有抗生素，嗜热芽胞菌生长受到抑制而无法产酸，指示剂将不变色。这一方法操作简单，实用，容易判断，结果可靠，相对费用较低，但是其结果偶尔会出现假阳性，此方法适用于农场、企业、实验室及政府监测部门。

4.蓝黄检测法

该方法是一种广谱的微生物抑制法，相对而言，耗时短，可以在短时间内检查出抗生素的残留情况，只要通过颜色对比既可以得出结论，通过这一检测方法得到的检测结果存在着一定的误差，容易造成误检，但是耗时短，费用低。

5.现代仪器分析法

这一方法主要是借助现代仪器进行检测，测定其残留的抗生素种类，*常用的是色谱法、荧光法、毛细管电泳、色谱质谱联用技术等。运用不同的理论，采用不同的手段进行检测，提高检测的标准，加强检测的质量。相对而言，该方法分离速度快，高效，实现自动化控制，可以检测出抗生素的具体含量，其结果更加准确，但待检样品需经一系列的预处理，繁琐费时，还必须有相应的价格昂贵的仪器设备。一般在大型实验室使用，适合于精确测定。

6.生化免疫法

这是近年来随着新科技的发展而逐渐发展起来的，其是以抗原与抗体的特异性与可逆性进行结合，是一种分析就技术。基本原理家就是抗原体的竞争性结合，可分为酶联免疫测定法(ELISA)、荧光免疫测定法(FIA)、免疫分析技术与常规理化分析技术联用的方法等。几种方法各有优缺点，必须注重其综合使用，提高检测的质量与准确度。从其实践的结果来看，其对抗生素的残留现状检测效果良好，灵敏度*高，达到ng级水平;检测快速、专一性强。相对而言，此法具有高度的专一性，每检测一种抗生素就要制备或购买相应的抗原或抗体，导致检测费用较高。因此生化免疫检测法不可能取代色谱或光谱等常规分析方法，只能作为其重要的补充。

7.专一试剂盒法

所谓的专一试剂盒法就是根据含有芽孢杆菌的琼脂培养基和PH指示剂在一定的温度下进行培养，一般维持在65℃左右，孢子发育生长，降低培养基pH值，在pH指示剂的作用下，蓝(紫)色变为绿-黄色。生鲜牛乳中的抗生素残留使微生物生长和酸的产生受到抑制，由于没有酸生成，颜色将不会改变。目前在市场中普遍应用的试剂盒有两种，ECLIPSE50和ECLIPSE100两种试剂盒。相对而言，ECLIPSE100的精度高，但是ECLIPSE50的检测标准与方法以及检测结果都更加接近国际的水平，其操作简单方便，更具灵活性，无需做处理样品的工作，降低工作的难度，检测效果质量高，费用较低，因此目前其普及度较高。