HJ 1215-2021水质 浮游植物的测定 滤膜-显微镜计数法

百检网 2022-11-09

HJ 1215-2021 水质 浮游植物的测定 滤膜-显微镜计数法

1 适用范围

本标准规定了测定水中浮游植物的滤膜-显微镜计数法。本标准适用于地表水中浮游植物的快速测定。

当样品大过滤体积为 1000 ml 时,方法检出限为 40 cells/L。方法检出限计算方法详见附录 A。

2 规范性引用文件

本标准引用了下列文件或其中的条款。凡是注明日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本标准。凡是未注日期的引用文件,其新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。

GB/T 14581 水质 湖泊和水库采样技术指导

HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范

​HJ 494 水质 采样技术指导

3 术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1

浮游植物 phytoplankton

在水中营浮游生活的微小藻类植物,通常浮游植物就是浮游藻类,包括原核的蓝藻和其它各类真核藻类。

3.2

计数单位 counting unit

显微镜视野下选择计数的小单元,如细胞。

3.3

浮游植物密度 density of phytoplankton

单位体积内浮游植物的细胞数,cells/L。

3.4

显微镜计数视野 microscope counting field

显微镜视野中限定一定面积的区域,用来定量计数浮游植物。

4 方法原理

样品通过一定孔径的滤膜,群体、丝状体及单细胞浮游植物截留在滤膜上,滤膜经透明处理后在显微镜下镜检。

5 试剂和材料

除非另有说明,分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂,实验用水为新制备的去离子水或蒸馏水。

5.1 碘(I2)。

5.2 碘化钾(KI)。

5.3 甲醛溶液:w=37%~40%。

5.4 鲁哥氏碘液:

称取 60 g 碘化钾(5.2)溶解在 100 ml 水中,再加入 40 g 碘(5.1),充分搅拌使其完全溶解,加水定容至 1000 ml,转移至棕色磨口玻璃瓶,室温避光保存。

5.5 显微镜浸没油:nD23=1.515 或nE23=1.518,配透明玻璃滴棒。

5.6 滤膜:混合纤维素酯膜,直径 25 mm,孔径 0.45 μm~3 μm。

注:每批次滤膜应进行水化测试和油透明测试,满足可水化和可透明要求后方可使用。将 1 张未使用的滤膜放入盛水的烧杯中,若滤膜被水完全浸润,则滤膜可水化。取 1 张未使用的滤膜,置于滴有显微镜浸没油的载玻片上, 若滤膜被浸没油完全浸润,则滤膜可透明。

6 仪器和设备

6.1 25 号浮游生物网:网孔直径 0.064 mm,网呈圆锥形,网口套在铜环上,网底端有出水开关活塞。

6.2 定性采样瓶:30 ml~100 ml 广口聚乙烯瓶。

6.3 采水器:不锈钢或有机玻璃材质,圆柱形。容量和深度规格要满足采样要求。

6.4 定量采样瓶:1 L~2 L 广口聚乙烯瓶。

6.5 冷藏箱。

6.6 真空抽滤装置:包括漏斗(直径 25 mm,容积 200 ml)、多孔聚酯滤膜支撑板、收集瓶、真空泵(相对真空度≤-17 kPa,可调)。

6.7 载玻片:25 mm×76 mm。

注:载玻片和盖玻片使用前应用浓盐酸和乙醇浸泡。若条件允许,选择可直接使用的载玻片或盖玻片。

6.8 盖玻片:25 mm×25 mm。

6.9 无齿组织镊子。

6.10 载玻片晾片板:适配同规格载玻片。

6.11 烘箱:70 ℃±2 ℃,温度可调。

6.12 正置生物显微镜或倒置生物显微镜:物镜 4×、10×、20×、40×;目镜 10×或 15×。

6.13 载物台测微计:又称镜台测微计,1 mm/100 DIV,分划值为 0.01 mm。

注:DIV 指等分格,1 mm/100 DIV 即 1 mm 等分成 100 格。

6.14 惠普尔目镜分划板(Whipple grid):边长为 7 mm~10 mm 的正方形大格,划分为 100 个相同的正方形中格,位于中央的 1 个中格进一步划分为 25 个相同的正方形小格。

注:不具备惠普尔目镜分划板时,亦可使用同规格的网格型目镜分划板(即中央的中格未细分为 25 小格的网格型目镜分划板)。

6.15 计数器。

6.16 一般实验室常用设备。

7 样品

7.1 样品采集

7.1.1 定性样品

点位布设及采样频次按照GB/T 14581、HJ/T 91 和HJ 494 的相关规定执行。

使用 25 号浮游生物网(6.1)采集定性样品。关闭浮游生物网底端出水活塞开关,在水面表层至0.5 m 水深处以 20 cm/s~30 cm/s 的速度做“∞”形往复,缓慢拖动约 1 min~3 min,待网中明显有浮游植物进入,将浮游生物网(6.1)提出水面,网内水自然通过网孔滤出,待底部剩少许水样(5 ml~ 10 ml)时,将底端出口移入定性采样瓶(6.2)中,打开底端活塞开关收集定性样品。采集分层样品时,用 25 号浮游生物网(6.1)过滤特定水层样品,其他步骤同采集表层样品。定性样品采集完成后及时将浮游生物网清洗干净。样品采集后放入冷藏箱(6.5)冷藏避光运输。

如有定性样品采集技术规范,按技术规范有关要求执行。

7.1.2 定量样品

按照GB/T 14581、HJ/T 91 和 HJ 494 的相关规定采集定量样品。

使用采水器(6.3)采集 1 L~2 L 样品至定量采样瓶(6.4)中。若水体透明度较高,浮游植物数量较少时,应酌情增加采样体积。定量样品采集完成后,定量采样瓶(6.4)不应装满,以便摇匀。

注 1:有些浮游植物(如蓝藻)常上浮在水面或成片、条带分布,可在此水华密集区域采样作为峰值参考。注 2:定量样品采集应在定性样品采集之前。应保持固定时间段采样,以便结果之间可相互比较。

7.2 样品保存

7.2.1 定性样品

定性样品采集后应立即加入鲁哥氏碘液(5.4)固定,用量为水样体积的 1.0%~1.5%。镜检活体样品不加鲁哥氏碘液(5.4)固定。定性样品在室温避光条件下可保存 3 周;1 ℃~5 ℃冷藏避光条件下可保存 12 个月。活体样品 4 ℃~10 ℃冷藏避光条件下可保存 36 h。

7.2.2 定量样品

定量样品采集后立即加入鲁哥氏碘液(5.4)固定,用量为水样体积的 1.0%~1.5%。也可将鲁哥氏碘液(5.4)提前加入定量采样瓶(6.4)中带至现场使用。定量样品在室温避光条件下可保存 3 周;1 ℃~5 ℃冷藏避光条件下可保存 12 个月。

样品在保存过程中,应每周检查鲁哥氏碘液(5.4)的氧化程度,若样品颜色变浅,应向样品中补加适量的鲁哥氏碘液(5.4),直到样品的颜色恢复为黄褐色。

注:若样品需长期保存,应加入甲醛溶液(5.3),用量为水样体积的4%。

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