原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
产品名称 | 玄参PCR鉴定试剂盒说明书 |
英文名称 | Radix scrophulariae |
货号 | BJ-P988512 |
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到****。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为****。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
十七碳酸甲酯(标准品)英文名称: Hydroxyethyl Cellulose产品别名:1-Boc-3-羟甲基吡咯烷
石菖蒲(标准品)英文名称: Isopropyl β-D-thiogalactoside产品别名:2,3,6-三氟苯乙
石吊兰(标准品)英文名称: D-Mannose产品别名:3-(4-)戊二酸单酰
石吊兰素英文名称: D-Mannose产品别名:4-溴-2,6-二叔丁基苯酚
石斛酚(标准品)英文名称: N-Octanoyl-N-methylglucamine产品别名:3-二甲氨基
石斛碱(标准品)英文名称: N-Decanoyl-N-methylglucamine 产品别名:巴氯芬
石见穿(标准品)英文名称: n-Octyl-β-D-Thioglucopyranoside产品别名:N-叔丁氧羰基-L-焦谷氨酸苄酯
石椒草(标准品)英文名称: D(+)-Raffinose pentahydrate产品别名:2,3-二氟溴苄
石榴皮(标准品)英文名称: D-Sorbitol产品别名:2-氯-3-甲氧基苯
石榴皮鞣素;安石榴林(标准品)英文名称: N-Octyl-β-D-glucopyranoside产品别名:3,4-二甲氧基苯乙酮
石榴子(标准品)英文名称: L-(+)-Ribose产品别名:4-环己基苯酚
石杉碱甲(标准品)英文名称: L-(+)-Ribose产品别名:4-溴-3-氟
E选择素抗体 Sodium L-ascorbyl-2-phosphate 质量规格:>95%
大肠杆菌耐热性肠素抗体 3-Isobutyl-1-methylanxthine 质量规格:>99%,美国进口
泛素激活酶E1抗体 Procaine hydrochloride 质量规格:>99%,BR
表皮生长因子受体抗体 Procaine hydrochloride 质量规格:HPLC>99%,标准品
Ets转录因子家族ets1抗体 Vorinostat impurity 质量规格:>98%
早期B淋巴因子1抗体 Swertianolin 质量规格:HPLC≥98%,标准品
内皮素受体A抗体 saponin 质量规格:进分,≥10 %
表皮生长因子受体抗体 Aloperine 质量规格:HPLC>95%,BR
表皮生长因子受体抗体 Coniferyl alcohol 质量规格:>98%,sigma223735
玄参PCR鉴定试剂盒说明书提纯禽型结核菌素Anti-ATP2A3 Antibody规格: 5ml/50头份/2500IU
腊状芽胞杆菌Anti-ATP2A1 Antibody仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
假单胞菌Anti-ATP2A2 Antibody拉丁属名: Pseudomonas sp.
易变链霉菌Anti-ATP4B Antibody拉丁属名: Streptomyces mutabilis
酿酒酵母Anti-ATP2A2 Antibody拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
灰橙链霉菌Anti-ATP7A Antibody拉丁属名: Streptomyces griseoaurantiacus
pY26TEF-GPD@1Anti-ATP5MC1 Antibody拉丁属名: 宿主:DH5α,BL21
球孢白僵菌Anti-ATRX Antibody仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
松针散斑壳Anti-ATP7B Antibody拉丁属名: Lophodermium pinastri
PCR检测方法包括以下步骤:
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为:待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。