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1. 合用范畴合用于熟牛肉中的五种人工合成色素(柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄 、亮蓝)的测定。
2. 提取准确称取2±0.2 g 毁坏后的熟牛肉,于50 mL聚丙烯离心管中,插手5 mL丙酮:水(90:10)殽杂溶液,涡动1min,均质1min(1000rpm),4000 rpm离心5 min,转移上清液于50 mL离心管中,残渣用5 mL丙酮:水(90:10)殽杂溶液一再提取两次,归并上清液。上清液中插手10 mL石油醚(60-90℃),上下翻转5次,4000rpm离心3min,撤除石油醚层,基层于80 ℃氮吹至2 mL以下,插手定容至5 mL,混匀,待净化。
3. 净化预处理赏罚:向Welchrom® P-WAX(60mg/3mL)中插手3 mL甲醇、3 mL水,流出液弃去;上样:将上述提取液插手柱中,流出液弃去,用5 mL水涮洗样品管,转入SPE柱;淋洗:3 mL甲醇、3 mL甲醇:甲酸(6:4)依次过柱、3 mL正己烷过柱,小柱真空干燥5 min;洗脱: 3*1 mL 5%甲醇洗脱,网络;从头消融:80 ℃氮吹至干,1 mL水复溶,涡动30 s,过0.22μm滤膜,待说明;
4. 检测色谱前提:色谱柱: Ultimate® XB-C18 液相色谱柱(4.6 mm x 150 mm, 3 μm)
时刻(min) 活动相A(%) 活动相B(%)
0 92 8
1 92 8
4 80 20
9 10 90
11 10 90
11.1 92 8
17 92 8
活动相:A: 0.02mol/L乙酸铵水溶液(乙酸调理pH=4)B: 甲醇梯度洗脱措施见右图流速:0.7 mL/min进样量: 20 μL柱温: 40°C检测波长: 254 nm运行时刻:17 min
5. 附图
1.柠檬黄;
2.苋菜红;
3.胭脂红;
4. 日落黄 ;
5.亮蓝要领中行使到的耗材
1、柠檬黄尺度品:WEL-S-0001苋菜红尺度品:WEL-S-0002胭脂红尺度品:WEL-S-0003日落黄尺度品 :WEL-S-0004亮蓝尺度品:WEL-S-0005
2、固相萃取小柱:Welchrom® P-WAX(60mg/3mL,P/N:WSP050306)
3、液相色谱柱:Ultimate® XB-C18,4.6 mm x 150 mm, 3 μm(Ult3B18415)
4、13mm,孔径0.22μm尼龙针孔滤膜(P/N: WEL-SFNY213022)
5、12孔固相萃取装置(WEL-Vac-12)