抗生素、甲硝唑测试
百检网 2021-12-06
1 范围本规范规定了测定祛痘除螨类化妆品中盐酸美满霉素、二水土霉素、盐酸四环素、盐酸金霉素、盐酸多西环素、氯霉素6 种抗生素和甲硝唑的高效液相色谱法。本规范适用于祛痘除螨类化妆品中盐酸美满霉素、二水土霉素、盐酸四环素、盐酸金霉素、盐酸多西环素、氯霉素和甲硝唑含量的测定。2 方法提要盐酸美满霉素、二水土霉素、盐酸四环素、盐酸金霉素、盐酸多西环素、氯霉素和甲硝唑在268nm 处有紫外吸收，可用反相高效液相色谱分离，并根据保留时间和紫外光谱图定性，峰面积定量。各组分的检出限及取1g 样品时的检出浓度见表1。表1 各组分的检出限和检出浓度物质名称盐酸美满霉素甲硝唑二水土霉素盐酸四环素盐酸金霉素盐酸多西环素氯霉素检出限（ng） 50 50 1 1 1 1 1定量下限（ng） 152 0173 3840 152 0173 3840 3.3 3.3 3.3 3.3 3.3检出浓度（μg/g） 50 50 1 1 1 1 1*低定量浓度（μg/g） 152 0173 3840 152 0173 3840 3.3 3.3 3.3 3.3 3.33 试剂3.1 甲醇，色谱纯。3.2 乙腈，色谱纯。3.3 草酸，分析纯。3.4 盐酸（0.1mol/L）：取优级纯浓盐酸（ρ20=1.19g/mL）8.3mL 加水至1L。3.5 混合标准储备溶液：分别准确称取盐酸美满霉素、二水土霉素、盐酸四环素、盐酸金霉素、盐酸多西环素、氯霉素、甲硝唑各0.1000g，用少许甲醇（3.1）及盐酸（3.4）溶解，移入100mL 容量瓶中，甲醇定容至刻度，摇匀，配成各组分质量浓度为1.00g/L 的混合标准溶液。4 仪器4.1 高效液相色谱仪，具二*管阵列检测器，色谱处理机或色谱工作站。4.2 微量进样器或自动进样装置。4.3 超声波清洗器。5 分析步骤5.1 样品预处理准确称取样品约1g 于10mL 具塞比色管中，加入甲醇（3.1）+盐酸（3.2）=1+1 的混合溶液至刻度，振摇，超声提取20min～30min。经0.45μm 滤膜过滤，滤液作为待测溶液备用。2535.2 色谱参考条件色谱柱：C18 柱，250mm×4.6mm I.D.，5μm；检测器：二*管阵列检测器，检测波长268nm；流动相：0.01mol/L 草酸溶液（磷酸调节水溶液的pH至2.0）+甲醇+乙腈=67+11+22（HPLC分析前，经0.45μm 滤膜过滤及真空脱气）；流量：0.8mL/min；柱温：室温。5.3 校准曲线的制备准确移取不同体积的混合标准溶液（3.5）于10mL 具塞比色管中，用流动相稀释至刻度，摇匀。经0.45μm 滤膜过滤备用。在设定色谱条件下，分别取10μL 进行分析。根据标准系列质量浓度和峰面积绘制校准曲线。5.4 样品测定在设定的色谱条件下进10μL 样品溶液（5.1）进行分析，若样品含量过高，应用流动相稀释后测定。根据峰面积，从校准曲线上查得相应成分的质量浓度。6 计算ρ×Vω（抗生素、甲硝唑）＝m式中：ω（抗生素、甲硝唑）——化妆品中抗生素、甲硝唑的质量分数，μg/g；ρ——测试溶液中抗生素、甲硝唑的质量浓度，mg/L；V——样品定容体积，mL；m——样品取样量，g。7 色谱图图1 抗生素、甲硝唑的色谱图1：盐酸美满霉素；2：甲硝唑；3：二水土霉素；4：盐酸四环素；5：盐酸金霉素；6：盐酸多西环素；7：氯霉素254