1.1主要仪器与试剂
1.2实验方法与测试条件
以二甲基亚砜(DMSO)为溶剂空白：二甲基亚砜，扫描范围：200～700nm，记录样品紫外–可见吸收光谱;采用KBr压片法，测定范围：4000～400cm–1，分辨率：4cm–1，记录样品红外光谱;以CDCl3为溶剂，测试温度为25℃，使用5mmNMR探头，以四甲基硅烷(TMS)为内标测定样品NMR谱;采用电轰击模式(EI)离子源，离子源温度200℃，扫描范围为20～600u，电子轰击能量为70eV。
2结果与讨论
2.1紫外–可见吸收光谱
金雀花碱甲醇溶液的紫外光谱中，于λmax=306nm处有*大吸收，是由芳杂环的双键共轭的烯烃产生的*大吸收峰;λ=233nm的吸收峰由—O=C基团的n–π*的电子跃迁产生。说明本品的紫外吸收符合金雀花碱的紫外吸收特征。
2.2红外吸收光谱
采用溴化钾压片法测其红外光谱，测定数据见表1。
金雀花碱红外光谱图中3083cm–1处的弱吸收峰为双键的=CH伸缩振动，1563，1540cm–1为C=C双键的伸缩振动，746，735，820，791cm–1为顺式、三取代双键的特征，这些都与预定结构的环状双烯结构应有的吸收一致，1649cm–1处的强吸收为羰基伸缩振动，由于与双键的共轭作用，吸收频率较低，证明存在该结构：
。3442，3315，3281cm–1为仲胺的—NH伸缩振动特征，与预定结构的—NH应有的吸收一致，1479，1441，1452，1358，1346，1310cm–1为—CH
的弯曲振动，证明存在结构：
。
上述结果表明：金雀花碱样品化学结构中存在羰基、双键、叔氨基特征，样品的红外光谱吸收与预订的化学结构红外吸收一致。
2.3核磁共振波谱
使用氘代氯仿(CDCl3)溶解试样，四甲基硅烷TMS作内标(δ0)，按1.2测定金雀花碱的1HNMR，13CNMR，DEPT135，DEPT90，1H–1HCOSY，1H–1H
NOESY，1H–13CHSQC及1H–13CHMBC谱，1HNMR，13CNMR谱图分别见图1、图2，测定数据见表2。
对金雀花碱样品的一维、二维NMR图谱进行分析，认为金雀花碱符合预定化学结构(见图3)。
样品的1HNMR谱图中，δH7.30峰是溶剂峰(未氘代完全的氯仿)，δH2.17峰是残留的微量丙酮溶剂峰，δH0.00峰为内标四甲基硅烷(TMS)峰，其余信号为金雀花碱样品的谱峰。氢谱中设定δH6.45的dd峰积分值为1，则图谱总积分值为14，与预定分子结构中的氢原子数目完全一致。δH5.50～δH7.50之间有三簇峰，分别为δH6.85(dd，J=6.9，1.1Hz)，δH6.45(dd，J=9.1，1.4Hz)，δH7.29(dd，J=9.1，6.9Hz)，从化学位移、耦合常数分析，应为芳杂环氢，且3个氢紧邻，可分别归属为H–8，H–7，H–9。δH1.45的宽矮峰含一个氢，归属为NH信号H–1。其余δH1.80～δH4.50之间有几簇峰为环上的亚甲基，次甲基信号，H–4为手性亚甲基，两个氢不等价，且受羰基与氮原子的影响，出现在较低场δH4.12(d，J=15.6Hz)与δH3.90(dd，J=15.6Hz，0.9Hz)，H–13则出现在较高场δH1.96，其余信号准确归属需要二维谱。
样品的13CNMR图谱中，δC77.1处的三重峰为溶剂峰(氘代氯仿)，δC0.00为内标四甲基硅烷(TMS)，剩余有11条谱线，与预定分子碳数目11一致。利用DEPT谱可判定11个碳中有2个季碳，6个仲碳，2个叔碳，与预定结构一致。δC163.6的季碳为羰基C–6，δC163.6的季碳则为芳杂环季碳C–10，δC138.7，δC116.5，δC104.9的叔碳为芳杂环次甲基碳C–8，C–7，C–9。其余几条碳为环烷上的亚甲基、次甲基信号。1H–1HTOCSY谱可以提供各自旋体系的耦合信息，从1H–1HTOCSY谱中可以看出，有两条自旋体系链，一组为芳杂环体系，另一组为环烷体系。1H–1HCOSY可以提供1H–1H之间通过成键作用的相关信息，将自旋体系内直接相邻的1H信号关联起来。从图中可以看出，δH6.85(H–8)峰与δH6.45(H–7)、δH7.29(H–9)峰有耦合，形成芳杂环上相邻三个氢一个自旋片断。δH4.12(H–4a)、δH3.9(H–4b)峰只与δH2.32(m)峰有相关性，证实δH2.32(m)峰对应于H–3。δH2.32(m，H–3)峰还与δH1.96(H–13)、δH3.09峰相关，故δH3.09峰对应于H–2。1H–13CHSQC谱可以将直接相连的氢与碳信号峰对应于1HNMR和13CNMR信号，为确证其结构提供了进一步的证据。而δC163.6等季碳则无氢信号相对应，进一步证实了季碳结构。不对称的CH2则由一个碳信号对应于2个氢信号，如δC49.7为C–4，其对应于2个氢信号δH4.12(H–4a)与δH3.90(H–4b)。其余直接相关信号都将一一对应。由于氢信号的归属，使得相应的碳信号明确。采用1H–13CHMBC可确定季碳信号归属，并对整个体系信号作进一步验证。从1H–13CHMBC谱图中可以看出，δC163.6峰与H–8、H–7、H–4有相关性，证实该碳信号在结构中位置为C–6。δC163.6峰则与H–8、H–9、H–4相关，同时还与H–12相关，证实该碳信号为C–10。C–2与C–12化学位移较为接近，从结构可知，C–2与H–4为三键，可观测到远程相关信号，C–12与H–4有5键，信号弱或没有。通过HMBC图中可以看到，只有δC53.0峰与H–4有相关信号，证实δC53.0峰对应于C–2。从图中还可以看到C–11与H–9、H–13、H–12的相关信号。其余相关点也能观测到，与图3结构一致。NOESY谱可以进一步确认化合物的空间结构，同时也为相邻片断的位置判定提供依据。从NOESY谱中可以看出，δH3.08(H–2)峰与δH1.45(NH)峰存在空间耦合。δH7.29(H–9)峰与δH2.90(H–11)峰存在空间耦合。这些信息也与其预定结构完全一致。以上推断证实样品金雀花碱结构与图3结构一致。将其NMR数据结果及解析一并列入表2中。
注：δC表示碳的化学位移，δH表示氢的化学位移;*C表示季碳，s，
d，dd，m，分别表示单峰，双峰，两个双峰，多重峰;J为耦合常数。1H，2H，3H分别表示1，2，3个氢原子;表中编号与图3中编号一致。
2.4电子轰击质谱图
取适量金雀花碱样品放入进样杆，进行质谱分析，其质谱图见图4。用所得试样的质谱图进行谱库搜索，从NIST08谱库中检索得到相似度为96%的金雀花碱谱图，分子式为C11H14N2O，相对分子质量为190.24。CAS编号为485–35–8，外文名为Cytisine。
质谱图中*高质荷比m/z190为样品的分子离子峰，说明其分子量为190，与预定结构分子量一致;从*高质荷比与高端质荷比之差分析m/z190–175=15;化合物质谱裂解丢失合理，化合物的分子量为190u。分子离子m/z190丰度比较大表明化合物中含有多重共轭基团，且具有环状结构，使分子稳定性较高。另外谱图中m/z146、m/z44为化合物裂解生成的碎片峰。m/z44是化合物羰基的α裂解或N的i裂解产生的碎片峰，其结构式为：
化合物中主要碎片峰m/z190，m/z160，m/z146，m/z44，m/z134等符合化合物应有的裂解机理。离子的具体裂解模式见图6。
4结论
研究运用UV，IR，1D和2DNMR与MS4种波谱技术对金雀花碱的结构进行了详细解析，确定了
IR信号峰归属、NMR中主要碳(氢)信号的归属以及相互耦合关系、MS主要碎片离子的裂解途径，这对金雀花碱及其同类药物的结构鉴定和质量控制有重要价值。
