甲卡西酮是一种合成的新型毒品[1–4]，近年来在我国的滥用日益猖獗。如何对缴获样品中的甲卡西酮进行定性定量分析，直接关系到对犯罪分子的定罪量刑，因而成为实战中迫切需要解决的问题。有关甲卡西酮的分析方法有液相色谱法[1]、气质联用法[5–6]等，但关于甲卡西酮液质联用方面的分析方法未见报道。出于实际办案的需要，笔者建立了甲卡西酮的LC–MS/MS定性定量分析方法。该方法与已报道的方法相比具有灵敏度高、分析时间短、流动相消耗少、线性范围良好等优点。
1实验部分
1.1主要仪器与试剂
三重串联四*杆液质联用仪(LC/QQQ)：Agilent6460型，由Agilent1290系统和6460三重四级杆质谱系统组成，美国安捷伦公司;乙腈：色谱纯，美国Fishier试剂公司;甲酸：色谱纯，瑞士Fluka公司;甲卡西酮标准品：1mg/mL，作为标准储备溶液，美国Cerillent公司。
1.2色谱条件
色谱柱：AgilentZorbax®EclipsePlusC18色谱柱(100mm×2.1mm，1.8μm);流动相A为0.1%甲酸溶液，B为乙腈，流速为0.3mL/min，梯度洗脱程序见表1;进样量：3μL。
1.3质谱条件
使用ESI离子源，正离子轰击模式;雾化气压力：172.4kPa(25psi);干燥气流速：10L/min;干燥气温度：350℃，ΔEMV为400V;母离子、子
离子、碰撞电压、碰撞能量见表2。甲卡西酮标样的MRM图谱及提取质谱图如图1所示。
1.4定性定量方法
LC–MS/MS定性准则参照国际兴奋剂检测标准WADATD2003IDCR文件[7]制订：(1)目标物与标准对照品保留时间误差在±2%之内或±0.4min之内;(2)目标物的两个母离子–子离子对峰面积的比率与标准对照品的两个母离子–子离子对峰面积的比率相对误差在±15%之内。定性认定的前提是目标与标准对照品的浓度相匹配，如果浓度过高出现超载，则应稀释后重新进样。LC–MS/MS定量采用外标标准曲线法，采集模式选择多反应监测(MRM模式)。多反应监测可以进行两次离子选择，即通过MS1选择一定质量的母离子，与气体碰撞断裂后，再经过MS2选择一定质量的子离子，这样大大提高了分析的专一性和灵敏度。
2结果与讨论
2.1液相色谱条件选择
由于分析物是碱性化合物，因而选用正离子模式，流动相选用酸性物质，分析中使用0.1%的甲酸。比较甲醇和乙腈作为有机相，结果表明，乙腈的洗脱能力较强，峰形较好，因而选择乙腈。使用梯度洗脱是为了保证有较好的保留时间和峰形。
2.2质谱条件选择
通过SCAN模式扫描，确定[M+H]+为164.2。
2.2.1通过选择离子监测，优化毛细管出口电压碰撞诱导解离是指通过与性分子碰撞将能量传递给离子的过程。Fragmentor电压是毛细管出口的电压，决定母离子能否飞到四级杆，保证母离子的传输效率，因此是需要优化的重要参数之一。
在SIM模式下，选择了80，100，120，140四个碰撞电压，得到四个响应强度。响应强度*强的是80，继续优化，即选择75，80，85，90四个碰撞电压，
*终选择响应*强的85作为*终优化结果。
2.2.2通过子离子扫描，选择子离子，同时优化碰撞能量(CE)
通过**组四级杆做SIM，只允许164.2的离子通过，第二组四级杆做SCAN，得到响应*强的两个子离子，分别为131.1和77.2。同时优化这两个子离子的CE值，选择10，20，30，40四个CE值，*终131.1的子离子CE值为20，77.2的子离子CE值为50。
2.2.3雾化气压力的优化
由于柱流速是0.3mL/min，雾化气的参考压力为138～207kPa(20～30psi)，因此雾化气压力选择138，172，208kPa(20，25，30psi)分别优化，考查峰面积的响应值，*终选择的雾化气压力为172kPa(25psi)。
2.2.4干燥气流速的优化
干燥气的参考流速是8～10L/min，因此选择8，9，10L/min分别优化，考察峰面积的响应值，*终选择的干燥气流速为10L/min。2.2.5干燥气温度的优化干燥气的参考温度是300～350℃，因此选择300，310，320，330，340，350℃6个温度点进行优化，考察峰面积的响应值，*终选择的干燥气温度为
350℃。
2.3标准曲线
利用卡西酮标准储备溶液依次稀释成质量浓度分别为25000，10000，5000，2500，1000，500，250，100，10，1，0.1ng/mL的系列标准液。分别取不同浓度的标准液3μL进样，选择响应*强的transition(164.2→131.1)记录峰面积。每个浓度进样3次，并对3次峰面积的平均值A及质量浓度c(mg/mL)进行线性回归，得甲卡西酮的回归方程：A=952.98c+41194，r2=0.9998，线性范围为0.1～10000ng/mL，检出限为0.04ng/mL(S/N≥3)。
2.4精密度试验
取浓度为500ng/mL的甲卡西酮标准溶液，连续进样10针，样本的保留时间分别为2.224，2.212，2.201，2.205，2.212，2.206，2.205，2.2，2.195，2.219min，峰面积分别为18966，21784，21519，21663，21802，21765，22108，22415，27816，计算样本的日内相对标准偏差;连续检测6天，样本的保留时间分别为2.227，2.205，2.211，2.205，2.212，2.226min，峰面积分别为21802，21663，21519，21732，21784，18966，计算样本的日间相对标准偏差，结果见表4。
2.5准确度试验
采用加标回收方法，称取已知甲卡西酮含量的样品3份，分别加入低、中、高3个浓度的标准溶液，按上述方法测定，结果见表5。由表5可知，甲卡西
酮回收率为95.6%～100.7%，说明方法的准确度较高
2.6样品测定
应用此方法对某市公安局送检的一样品进行分析，通过与甲卡西酮标准品进行比对，保留时间一致，2个母离子–子离子对的峰面积比例与标准品接近，定性确定其为甲卡西酮。使用外标标准曲线法定量计算浓度，*终确定甲卡西酮的含量为25.4%。该检测结果为对犯罪分子定罪量刑提供了依据。
3结语
建立了甲卡西酮的LC–MS/MS定性定量分析方法，超高效液相色谱的快速分析和质谱的MRM检测模式以及高分辨率，使该方法所得到的数据准确可靠，分析时间仅为7min。与传统液相色谱相比，该法大大缩短了分析时间并且提高了分析灵敏度，为样品快速分析提供了可靠的分析平台。
