1.每种荧光染料,均有自己的*适PH值,此时荧光*强。当pH改变时,不仅荧光强度减弱,而且波长将有所改变,因此荧光检测时要在一定的PH值的缓冲液中进行。
2.放荧光染色在20。C以下时荧光比较稳定,温度升高常出现温度猝灭。
3.在荧光观察中,常因激发光的增强而使样品荧光很快衰竭,造成观察和照相困难。为此*好用能量小的长波长光进行观察,需照相时再适当增强激发光。
4.一般荧光染液的浓度在万分之一以下,甚至亿万分之一,也能使标本着色。在一定的限度内,荧光强度可随荧光素的浓度增加而增强,但超过限度,荧光强度反而下降,这是由于荧光分子间的缔合而使自身荧光猝灭所致。