1 范围
SN/T 2206的本部分规定了化妆品中金黄色葡萄球菌的多重实时荧光PCR检测方法。
本部分适用于化妆品中金黄色葡萄球菌的定性检测。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格和试验方法
GB 7918.1 化妆品微生物标准检验方法 总则
GB 7918.5 化妆品微生物标准检验方法 金黄色葡萄球菌
SN/T 1193 基因实验室技术要求
3 术语、定义和缩略语
下列术语、定义和缩略语适用于本文件。3.1 术语和定义
Ct值 Cycle threshold Ct
每个反应管内的荧光信号到达设定的阑值时所经历的循环数。
3.2 缩略语
Taq:水生栖热菌(Thermus aquaticu)
FAM:6-羧基荧光素(6-carboxyfluorescein)
HEX:6-羟基-2’,4,4’,5', 7’,7’-六氯荧光素(5-hexachioro--fluorescein)
BHQ:黑洞淬灭基(Black hole quencher)
4 检测方法
4.1 方法原理
加人多对引物和与模板DNA匹配的、两端有荧光基团标记的寡核昔酸探针进行PCR反应。PCR 每进行一次循环,合成的新链数与释放的荧光基团数呈对应关系,即PCR产物的量与荧光信号的强度呈对应关系。当荧光信号超过所设定的阑值时,荧光信号可被检测出来,仪器检测荧光信号的增加量可以间接地体现样品模板DNA的目的基因的扩增量。