1 范围
本标准规定了化妆品中氨基酸含量的茚三酮比色测定法。
本标准适用于化妆品中蛋白质及其水解液、氨基酸含量的测定。
本方法小检测浓度为0.01%。
2 引用标准
下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时,所示版本均为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准新版本的可能性。
GB/T 8170-1987 数值修约规则
3 原理
蛋白质物质经水解成氨基酸,而氨基酸在一定的pH条件下,与茚三酮反应生成蓝紫色化合物,对其进行比色定量测定,从而计算出相应的氨基酸含量。
4 试剂
分析中应使用分析纯(AR)试剂,试验用水应为蒸馏水或纯度相当的水。
4.1 2%茚三酮溶液
称取茚三酮 1.0 g,溶于一定量热水中,待冷却后定容至50 mL。该溶液每隔天需重新配制。
4.2 磷酸盐缓冲溶液(pH=8. 04)
4.2.1 1/15 mol/L磷酸二氢钾溶液
称取磷酸二氢钾(GB/T 1274)9.070g,溶于水中后定容至1L。
4.2.2 1/15mo1/L磷酸氢二钠溶液
称取磷酸氢二钠(GB/T 1263)23.876g,溶于水中后定容至1L。
4.2.3 取4.2.1溶液5.0mL于100mL容量瓶中,用4.2.2溶液稀释至刻度,摇匀。
4.3 盐酸(GB/T 622)6mol/L溶液
4.4 氨基酸标准溶液(200μg/mL)
准确称取白氨酸0.2000g,用水溶解并定容至100mL,摇匀后再吸取10mL于100mI,容量瓶中加水稀释至刻度。
4.5 蜡块
蜂蜡与石蜡之比为1:9。
5 仪器
5.1 分光光度计:波长范围400 nm~700 nm。