婴幼儿食品和乳品中维生素B1怎么检测?目前对于婴幼儿食品和乳品中维生素B1有对应的检测方法标准依据。今天百检网就给大家介绍一下婴幼儿食品和乳品中维生素B1的测定方法相关信息。
检测方法标准依据：GB 5413.11-2010 婴幼儿食品和乳品中维生素B1的测定
1.范围
本标准规定了婴幼儿食品和乳品中维生素B1的测定方法。
本标准适用于婴幼儿食品和乳品中维生素B1的测定。
2.规范性引用文件
本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件,其*新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。
3.原理
样品在稀盐酸环境中恒温水解,酶解,样液用碱性铁氰化钾衍生,正丁醇(或异丁醇)萃取后,经C18反相色谱柱分离,用荧光检测器(Ex:375mm,Em:435nm)检测,外标法定量。
4.试剂和材料
除非另有规定,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。
4.1 正丁醇或异丁醇。
4.2 铁氰化钾。
4.3 氢氧化钠。
4.4 浓盐酸。
4.5 三水乙酸钠。
4.6 冰乙酸。
4.7 甲醇:色谱纯。
4.8 维生素B1标准品:硫胺素盐酸盐或硫胺素硝酸盐,纯度≥99%。
4.9 铁氰化钾溶液(20g/L):称取2g铁氰化钾(4.2),用水溶解并定容至100mL。临用前配制。
4.10 氢氧化钠溶液(100g/L):称取25g氢氧化钠(4.3),用水溶解并定容至250mL。
4.11 碱性铁氰化钾溶液:将5mL铁氰化钾溶液(4.9)与200mL氢氧化钠溶液(4.10)混合。临用前配制。
4.12 盐酸(0.1mol/L):吸取9mL浓盐酸(4.4),溶于1000mL水中。
4.13 盐酸(0.01mol/L):吸取0.1mol/L盐酸(4.12)50mL,用水稀释并定容至500mL。
4.14 乙酸钠溶液(0.05mol/L):称取6.80g三水乙酸钠(4.5),加900mL水溶解,用冰乙酸(4.6)调pH值至4.0～5.0,定容至1000mL。经0.45μm微孔滤膜过滤。
4.15 乙酸钠溶液(2.0mol/L):称取27.22g三水乙酸钠(4.5),用水溶解并定容至100mL。
4.16 混合酶溶液,称取2.345g木瓜蛋白酶(活力单位≥600U/g)、1.175g淀粉酶(活力单位≥4000U/g),用水溶解并定容至50mL。临用前配制。
4.17 标准溶液
4.17.1 维生素B1标准储备液(500μg/mL):称取相当于硫胺素50mg(精确至0.1mg)的维生素B1标准品(4.8),用0.01mol/L盐酸(4.13)溶解并定容于100mL。置于0℃~4℃冰箱中,保存期为3个月。
4.17.2 维生素B1标准中间液:准确吸取200mL标准储备液(4.17.1),用水稀释并定容至100mL,此溶液中维生素B1浓度为10μg/mL。临用前配制。
4.17.3 维生素B1标准工作液:分别吸取维生素B1标准中间液(4.17.2)0mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL、5.00mL、10.00mL,用水溶解并定容至100mL。该标准系列浓度分别为0μg/mL、0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.20μg/mL、0.5μg/mL、1.00μg/mL。临用前配制。
5.仪器和设备
5.1 高效液相色谱仪,带有荧光检测器。
5.2 高压灭菌锅。
5.3 离心机:转速≥4000转/分钟。
5.4 pH计:精度0.01。
5.5 组织捣碎机(转速在0转/分钟～12000转/分钟可调)。
5.6 0.45μm微孔有机滤膜。
5.7 天平:感量为0.001g和0.0001g。
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