参数规格:
产品名称:猪生殖与呼吸综合症病毒通用RT-PCR试剂盒
产品货号:FS-P013515
产品规格:50次
产品分类:纯化试剂盒
产品运输:低温运输
实验过程:
一、试剂准备 1. DNA模板 2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步骤 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。 |
注意事项
1.公司产品仅用于科研整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2.为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3.每次实验应该设置阴、阳性对照。
4.试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。
5.试剂盒内所配阴性和阳性对照在**次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。
6.为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7.仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。
8.ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。
9.实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
Human dynamin 2,DNM2 ELISA Kit 人发动蛋白2Multi-class antibodies: 48T
SP-B 肺表面活性蛋白B抗体Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的羊抗小鼠IgG 0.1ml
Cyt-C ELISA Kit 大鼠 96T
NIT2 NIT2蛋白抗体 0.2ml
BACE2 β淀粉样前体蛋白裂解2抗体 0.2ml
SP-B 肺表面活性蛋白B抗体Multi-class antibodies: 0.2ml
OPG(Human Osteoprotegerin) ELISA KIT 人骨保护Multi-class antibodies: 48T
Mre11/HNGS1 DNA损伤关键蛋白Mre11抗体Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Integrin Alpha V 整合αV抗体 0.2ml
HBcAb-IgM(Human hepatitis B virus core IgM) ELISA Kit 人抗乙型肝炎病毒核心IgM抗体 96T
PRPF4 PRPF4蛋白抗体 0.2ml
CEA 癌胚抗原抗体 0.1ml
Mre11/HNGS1 DNA损伤关键蛋白Mre11抗体Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit Mink IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的兔抗貂IgG 0.1ml
phospho-GABBR2 (Ser884) 磷化G基丁B型受体2抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh ARIP2B 激活受体2B抗体 0.2ml
IGFBP-2/FITC 荧光标记胰岛样生长因子结合蛋白-2抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MK IgM/Cy5 Cy5标记的兔抗猴IgM 0.1ml
PLGF/FITC 荧光标记小鼠胎盘生长因子抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
猪生殖与呼吸综合症病毒通用RT-PCR试剂盒外来毛霉种属: Mucor│adventitius分离基物: 土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 192生长条件: 25-28℃存储条件: 真空冷冻干燥法
浅灰链霉菌种属: Streptomyces│griseolus提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 12生长条件: 28℃存储条件: 真空冷冻干燥法
蜡状芽孢杆菌种属: BacilluscereusFranklandandFrankland安全等级: 1模式菌株: no培养基: 2生长条件: 30℃
阴沟肠杆菌种属: Enterobacter│cloacae分离基物: 野生稻茎提供形式: 斜面培养物模式菌株: no应用领域: 研究培养基: 0002生长条件: 30℃存储条件: -80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法;矿物油法
非小肺癌相关抗原211(CA211)ELISA试剂盒D-别苏氨 99%迷迭香 97%醋锂,二(AR)
非小肺癌抗原(LTA)ELISA试剂盒D-酪氨 98%雷帕霉 分析标准品,≥98%聚蔗糖400
非神经元性烯化(NNE)ELISA试剂盒DL-色氨 99%雷帕霉 98%二硝基杨
非甲基化寡核苷(NON)ELISA试剂盒D-色氨 98%酯蟾配基 分析标准品,≥98%二钠
芳香烃受体(AhR)ELISA试剂盒DL-酪氨 98%红景天苷 分析标准品,≥97.5%(HPLC)二氢钠二
泛连接(E3/UBPL)ELISA试剂盒D-缬氨 98%柴胡皂苷A 分析标准品,≥98%二(AR)
泛结合(E2/UBCE)ELISA试剂盒D-缬氨乙酯盐盐 98%柴胡皂苷D 分析标准品,≥98%化锰四
泛激活(E1/UBAE)ELISA试剂盒DL-缬氨 98%菝葜皂苷元 分析标准品,≥98%烯葡聚糖凝胶S-100 HR
泛分解(DUB)ELISA试剂盒L-缬氨甲酯盐盐 99%斯皮诺 分析标准品,≥97%烯葡聚糖凝胶S-200 HR
泛蛋白D(UBD)ELISA试剂盒环羧 98%飞蓟宁 分析标准品,≥98% 烯葡聚糖凝胶S-300 HR
泛蛋白(Ub)ELISA试剂盒吡咯 99%飞蓟亭 分析标准品,≥98% 烯葡聚糖凝胶S-400 HR
反状腺原氨(rT3)ELISA试剂盒1-四氢萘酮 97%西罗莫司 分析标准品,≥98%烯葡聚糖凝胶S-500 HR
法尼基二法尼基转移1(FDFT1)ELISA试剂盒钨铵 99.99% (metals basis)茵芋苷 分析标准品,≥98%干酪
法尼X受体(FXR)ELISA试剂盒钨铵 AR,99%知母皂苷元 分析标准品,≥98% 化锌
发动蛋白2(DNM2)ELISA试剂盒仲钨铵 99.95 %千金藤啶 分析标准品,≥98%医用凡士林
二酰基甘油(DAG/DG)ELISA试剂盒钼铵,四 AR五味子 分析标准品,≥98%原钒钠