液体乳中青霉噻唑酸钾怎么检测?目前对于液体乳中青霉噻唑酸钾有对应的检测方法标准依据。今天百检网就给大家介绍一下液体乳中青霉噻唑酸钾的测定方法相关信息。
检测方法标准依据：DB13/T 1106-2009 液体乳中青霉噻唑酸钾的测定 高效液相色谱法
1 范围
本标准规定了液体乳中青霉噻唑酸钾的高效液相色谱测定方法。
本标准适用于液体乳中青霉噻唑酸钾的测定。
本标准的方法检出限：10.0μg/kg。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否使用这些文件的*新版本。凡是不注日期的引用文件，其*新版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 原理
试样中的青霉噻唑酸钾在去除蛋白、脂肪处理后，经高效液相色谱分离，紫外检测器检测，外标法定性定量。
4 试剂和材料
除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682 规定的一级水。
4.1 甲醇：色谱纯
4.2 磷酸二氢钠。
4.3 磷酸二氢钠溶液(pH=4.5)：
4.4 无水乙醇。
4.5 青霉素V钾标准品：纯度≥99‰。
4.6 青霉噻唑酸钾标准储备液(1mg加L)：准确称取0.1000g青霉素Ⅴ钾置于100mL容量瓶中，加入1mL青霉素酶，室温放置2h后用水定容，摇匀备用。
4.7 青霉素噻唑酸钾标准冮工作溶液：根据需要吸取适量青霉噻唑酸钾标准储备液，用空白样品稀释成适当浓度的基质混合标准工作溶液。
5 仪器
5.1 高效液相色谱仪：配有紫外检测器(UV)。
5.2 分析天平：感量0.1mg和0.01g各一台。
5.3 低温高速离心机。
5.4 水相微孔滤膜：0.45μm。
6 测定步骤
6.1 试样溶液的制备
准确称取25g(精确到0.01g)牛乳于50mL离心管中，4000r/min低温(4℃)离心10min;去除上层脂肪层;再加入25mL无水乙醇，20000rmin低温(4℃)离心10min，取上清液定容至50mL，经0.45μm微孔滤膜过滤，待高效液相色谱分析。
6.2 液相色谱条件
检测波长：230nm。
色谱柱：ODS C 18 5μm，250mm×2.1mm或相当者。
流动相：磷酸二氢钠溶液：甲醇=50：50。
流速：1mL/min。
柱温：30℃。
进样量：20μL。
6.3 测定
用青霉噻唑酸钾标准储备溶液配成的基质标准溶液分别进样，以标准工作溶液浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线。用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中青霉噻唑酸钾的响应值均应在仪器测定的线性范围内。
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