为快速了解生产情况和产品质量情况，比较了大量的蛋白质测定法，现将甲醛法介绍给大家，供参考。
一、样品的制备
在生产线随机采集样品(我公司生产的是玉米蛋白粉，不需粉碎；如果是豆粕颗粒较大的饲料，需粉碎后全部通过40目筛)，分别采用四分法将检样缩至500g，装于密闭容器中，防止试样成分变化或变质。
二、原理
将试样置于三角瓶中，加过氧化氢、浓硫酸，加热。在有机物分解时，蛋白质及有机氮化合物中的氮形成铵盐，甲醛与铵盐可发生络合反应生成六次甲基四胺〔(CH2)6N4〕，在反应中同时生成等量的硫酸，用碱液直接滴定，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白的含量。
反应机理如下:
2NH2(CH2)2COOH+H2SO4+12H2O2=(NH4)2SO4+6CO2+16H2O (1)
2(NH4)2SO4+6HCHO=(CH2)6N4+2H2SO4+6H2O (2)
三、仪器和试剂
(1)150mL三角烧瓶
(2)(1000～2000)W可调电炉
(3)氢氧化钠标准溶液:c(NaOH)=0.05mol/L
(4)氢氧化钠溶液:c(NaOH)=0.1mol/L
(5)4mol/L硫酸溶液
(6)40%的氢氧化钠溶液
(7)1:1甲醛-乙醇溶液
(8)0.2%甲基红指示液
(9)1%酚酞指示液
四、试验步骤
称取试样(0.5～1)g准确至0.0001g，放入三角烧瓶中，加入2mL浓硫酸、10mL过氧化氢，先用低温加热消化至泡沫消失，再加大功率，直至瓶中白烟基本赶尽，取下三角瓶冷却至室温，加蒸馏水50mL摇匀，再加0.2%甲基红指示液2～3滴，用40%氢氧化钠溶液调至溶液显黄色，立即用4mol/L硫酸溶液滴加至红色，然后放在电炉上煮沸(1～2)min，取下加盖，冷却至室温，用0.1mol/L氢氧化钠溶液中和至溶液红色消失，加10mL的1:1甲醛-乙醇溶液(预先用酚酞为指示剂，用0.1mol/L氢氧化钠溶液中和至溶液显粉红色，pH=8.3)，酚酞指示剂2～3滴，摇匀后静止1min，使之反应完全，然后用0.05mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至溶液显粉红色，即为终点。记下消耗的氢氧化钠标准溶液的毫升数。
五、计算
式中:V——消耗氢氧化钠标准溶液的毫升数；c——氢氧化钠标准溶液浓度；M——样品质量，g；X0——样品的水分，%。
六、甲醛法与国标法测玉米蛋白饲料中粗蛋白的测定结果比较(见表1)
表1 测定结果比较
七、结束语
此方法在检验数据上与国标相比，相对偏差低于0.5%，但在检测时间上甲醛法做完一个样仅需(0.5～1)h，但国标法仅消化就需要2h以上，再加上蒸馏半小时、滴定等操作，需要(3～4)h。在生产过程中使用甲醛法进行产品判定，节省了时间，一旦产品质量出现异常就可立即作出纠正处理，节约返工造成的浪费。另外，在节能和废液处理上，因为甲醛法消化时间较短，节约了(2～3)kW·h的用电。因为不需要蒸馏，用的浓硫酸和氢氧化钠比国标法少，产生的废液也少，减少了环境污染。
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