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1范围
本标准规定了乳与乳制品检测非蛋白氮含量的测定方法。
本标准适用于鲜奶、乳粉检测非蛋白氮含量的测定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其*新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T601化学试剂标准滴定溶液的制备
GB/T602化学试剂杂质测定用标准滴定溶液的制备
GB5009.5食品安全国家标准食品检测蛋白质的测定
GB/T6682分析实验室用水规格试验方法
3术语定义
下列术语定义适用于本文件。
非蛋白氮含量non-protein-nitrogencontent
蛋白质以外氮的含量。
4方法提要
用丙酮沉淀乳蛋白，滤液水浴浓缩近干，经消化、蒸馏后用0.05mol/L硫酸滴定，计算非蛋氮含量。
5试剂材料
除另有规定外，所用试剂均为分析纯。
5.1水：GB/T682规定的一级水。
5.2丙酮。
5.3硫酸铜(CuSO4·5H2O)。
5.4硫酸钾(K2SO4)。
5.5硫酸(H2SO4密度为1.84g/L)。
5.6硼酸(H3BO3)。
5.7甲基红指示剂(C15H15N3O2)。
5.8溴甲酚绿指示剂(C21H14Br4O5S)。
5.9亚甲基蓝指示剂(C16H18CIN3S·3H2O)。
5.10氢氧化钠(NaOH)。
5.1195%乙醇(C2H5OH)。
5.12硼酸溶液(20g/L)：称取20g硼酸，加水溶解后并稀释至1000mL。
5.13氢氧化钠溶液(400g/L)：称取40g氢氧化钠加水溶解后，放冷，并稀释至100mL。
5.14硫酸标准滴定溶液(0.05mol/L)：按GB/T602配制标定。
5.15甲基红乙醇溶液(1g/L)：称取0.1g甲基红，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100mL。
5.16亚甲基蓝乙醇溶液(1g/L)：称取0.1g亚甲基蓝，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100mL。
5.17溴甲酚绿乙醇溶液(1g/L)：称取0.1g溴甲酚绿，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100mL。
5.18混合指示液：2份甲基红乙醇溶液(5.15)与1份亚甲基蓝乙醇溶液(5.16)临用时混合。也可用1份甲基红乙醇溶液(5.15)与5份溴甲酚绿乙醇溶液(5.15)临用时混合。
5.19滤纸：检测速定性滤纸。
6仪器设备
6.1分析天平：感量为0.1mg。
6.2定氮仪。
6.3具塞离心管：50mL。
6.4滴定管：10mL。
7试样制备与保存
试样混合均匀装入洁净的容器内，冷藏在0℃~4℃冰箱检测。试样应在试验前预先取出，并升至室温。
8分析步骤
8.1试样处理
准确称取混匀的固体样品试样约1g，液体样品约10g，精确至0.001g，置于离心管检测，固体样品检测加入10mL水，溶解混匀。试样加入40mL的丙酮溶液(5.2)，混匀，静置5min，用滤纸滤至定氮瓶检测，加入微量硫酸保持溶液呈酸性，沸水浴浓缩近干。向定氮瓶检测加亼0.2g硫酸铜(5.3、6g硫酸钾(5.4)及20mL硫酸(5.5)，轻摇后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45°斜支于小孔的石棉网上。小心加热，待内容物全部碳化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色并澄清透明后，再继续加热0.5h~1h取下冷却，小心加入20mL水，进行定氮蒸馏。
8.2测定
按GB5009.5**法规定执行，定氮蒸馏后，用0.05mol/L硫酸标准滴定溶液进行滴定。
8.3空白实验
除不加试样外，按上述步骤操作。
9结果计算
9.1试样检测非蛋白氮的含量按式(1)计算：
X——试样检测非蛋白氮的含量，%；
V1——试样消耗硫酸标准滴定溶液的体积，单位为毫升(mL)；
V0——空白消耗硫酸标准滴定溶液的体积，单位为毫升(mL)；
c——硫酸标准滴定溶液的浓度，单位为摩尔每升(mol/L)；
0.0140——1.0mL硫酸[c(1/2H2SO4)=1.000mol/L或盐酸[c(HCl)=1.000mol/L]标准滴定溶液相当的氮的质量，单位为克(g)；
m——试样质量，单位为克(g)。
9.2扣除试剂空白的测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留3位有效数字。
10精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的**差值不得超过算术平均值的10%。
