警告:操作人员应了解二噁英类分析操作的相关风险,并接受相关培训。实验中所使用的溶剂及标准样品均为有毒有害化合物,其溶液配制应在通风柜中进行,操作时应按规定要求佩戴防护器具,避免接触皮肤和衣物。
1 适用范围
本标准规定了筛查固体废物中二噁英类化合物的报告基因法。
本标准适用于固体废物中二噁英类化合物的筛查。
标准溶液的检出限和测定下限根据使用细胞的不同而异。当使用 H1L6.1c2 细胞时,标准溶液的检出限为0.980pg·TEQ/ml,测定下限为 1.96 pg-TEQ/ml,当取样量为3.5g时,方法测定下限为1.00pg-TEQ/g。
2 规范性引用文件
本标准引用了下列文件或其中的条款。凡是不注日期的引用文件,其有效版本适用于本标准。
HJ 77.3 固体废物 二噁英类的测定 同位素稀释高分辨气相色谱-高分辨质谱法
HJ/T 20 工业固体废物采样制样技术规范
HJ/T 298 危险废物鉴别技术规范
3 术语和定义
3.1 二 噁 英 类polychlorinated dibenzodioxins and polychlorinateddibenzofurans
指多氯代二苯并-对-二噁英和多氯代二苯并呋喃的统称。
3.2 芳香烃受体 arylhydrocarbon receptor
指一种配体激活的转录因子,其配体为二噁英类等多环芳烃,也可简称为 Ah 受体或 AhR。
3.3 报告基因 reporter gene
指一种位于启动子下游,编码可被检测的蛋白质或酶的基因,其表达产物可以定量测定。
3.4 二噁英应答序列 dioxin responsive element
指位于基因上的一段碱基序列。AhR 与配体结合后进入细胞核,与核转录因子接合形成复合体,DRE 可以与该复合体特异性识别并结合。
3.5 荧光素酶 luciferase
自然界中能够产生生物荧光的酶的统称,其中有代表性的为萤火虫的萤光素酶。
3.6 传代培养 subculture
指将冻存细胞或培养细胞的一部分,接种到新鲜培养基中继续培养的操作。