A.1―范围
本方法适用于检测洗碗机所用的形状不规则的抗菌部件的抗菌功能。A.2方法概述
将定量的待测样品置于定量菌悬液中,通过振荡使样品与菌悬液充分接触,振荡培养--定时间后,分别对试验组和对照组的含菌量进行计数,计算抗菌率。
A3试验菌种和佼器
A 3.1试验菌种
A.3.1.1试验菌种的选择
大肠埃希氏菌 Escherichia coli AS 1.0090
金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus AS 1.0089注:根据使用要求,也可选用其他菌种或菌株作为试验用菌。
所有菌种或菌株应由国家相应菌种保藏管理中心提供并在报告中标明试验用菌种名称及分类号。实验室应依据国家相关规定安全使用试验微生物,并且尽量选择非致病或低致病微生物。
培养菌种使用的各种培养基组份,应符合菌种保藏管理中心的要求。
所有涉及微生物操作的器皿和材料都应提前进行灭菌,**湿热灭菌(121℃,20 min).A.3.1.2培养条件
A.3.1.2.1菌种培养条件
如果菌种提供机构有特殊要求,应以其要求为准。没有特殊要求的,试验菌种的一般性培养条件应符合GB 21551.2-2010中A5.2和A5.3的要求。
本标准的试验条件都是以大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌为例,如果是其他试验菌种,相应的试验条件要随之改变。
A.3.1.2.2磷酸盐缓冲液
磷酸氢二钠(无水)
2.83 g
磷酸二氢钾
1.36 g
非离子表面活性剂吐温-80
1.0 g
蒸馏水
1 000 mL
高压蒸汽灭菌121 ℃,20 min。
A.3.1.3试验菌种的活化和菌液的制备
将标准试验菌株接种于斜面固体培养基上,在(37士1)℃条件下培养24h后,在5 ℃~10℃下保藏〔不应超过1个月),作为斜面保藏菌。
将斜面保藏菌转接到平板固体培养基上,在(37±1)℃条件下培养(24士1) h,每天转接1次,不超过2周。试验时应采用3~14代、24h内转接的新鲜细菌培养物。
用接种环从新鲜培养物上刮1~2环新鲜细菌,加入适量磷酸盐缓冲液中,并依次做10倍梯度稀释液,选择菌液浓度为 10° CFU/mL的稀释液作为试验用菌液,按GB 4789.2的方法操作。
A.3.2仪器
生化培养箱温控精度±1℃