检测及试验方法
苹果的鲜切加工
红富士苹果经自来水清洗后,在灭菌砧板上用灭菌的削皮刀削皮去除果核,切割成约1 cm×1 cm×1cm的小块备用。
鲜切苹果多酚的提取
提取溶剂为80%乙醇,料液比为1:6,均质后置于棕色瓶中,常温超声波提取30 min, 4℃12000r/min离心20 min,取上清液采用4.5μm滤膜过滤后进行液相分析。
标准工作曲线的建立
准确配制5个阶梯浓度的10种多酚物质的标准溶液,过0.45μm膜,按上述确定的色谱条件测定,以峰面积Y为纵坐标,质量浓度X为横坐标,绘制10条多酚标准曲线。
色谱稳定性检验结果
标样浓度为100 mg/L时,日内连续6次进样,保留时间的相对标准偏差(RSD)为0.89%,峰面积(Peak area)的RSD为2.23%;日间连续6 d进样,保留时间的RSD为1.29%,峰面积的RSD为2.51%。说明色谱工作性能稳定,测定结果可靠。
多酚回收率测定
向苹果多酚中定量添加已知浓度的不同标准样品,浓度分别为10μg/mL和50μg/mL。按照2.2.2样的方法制备测定多酚含量,根据测得样品中10种多酚含量来计算出相应的回收率。
10种多酚标准品液相色谱图
