乳与乳制品/婴幼儿食品检测

1范围
本标准规定了婴幼儿食品和乳品中维生素B:的测定方法。本标准适用于婴幼儿食品和乳品中维生素B:的测定。
2规范性引用文件
本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件,其*新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。
3原理
利用莱士曼氏乳酸杆菌(Lactobacillus leichmannii)对维生素Bp的特异性和灵敏性,定量测定出试样中维生素Bz的含量。在测定用培养基中供给除维生素Bg以外的所有营养成分,这样微生物生长产生的透光率就会同标准曲线工作液及未知待测溶液中维生索B:的含量相对应。以不同浓度标准溶液的透光率相对于各浓度水平标准物质的浓度绘制标准曲线,根据标准曲线即可计算出试样中维生素B:的含量。
4试剂和材料
除非另有规定,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682无识别结果4.1菌株:莱士曼氏乳酸杆菌(Lactobacillus leichmannii)ATC&7830。
4.2维生素B: (Vitamin Bp或Cyanocobalamin)标准品:分子式Ca;H. CoN,O,P,纯度≥99%。4.3培养基。
4.3.1乳酸杆菌琼脂培养基:见附录A。4.3.2 乳酸杆菌肉汤培养基:见附录A。4.3.3 维生素Bz测定用培养基:见附录A。
注:一些商品化合成培养基效果良好,商品化合成培养基按标签说明进行配制。
4.4 9 g/L氯化钠溶液(生理盐水):称取9.0 g氯化钠溶解于1 000 mL.水中,分装于具塞试管﹐每管10 mL。121℃灭菌15 min。
4.5妳乙醇溶液:体积分数为25%。4.6无水磷酸氢二钠(Na,HPO,)。4.7无水偏重亚硫酸钠(NagS O, )。
4.8柠檬酸(含一个结晶水)(CH:O。·H, O)。4.9标准溶液的制备。
4.9.1维生素B:贮备液(10 ug/mL):精确称取维生素B:标准品(4.2),用乙醇溶液(4.5)定容至维生素Bz浓度为10 ug / mL。
4.9.2维生素Bp中间液(100 ng/mL):用乙醇溶液(4.5 )将5.0 mL维生素Bz贮备液(4.9.1)定容至500 mL。
4.9.3 维生素Bp工作液(1 ng/mL):用乙醇溶液(4.5)将5.0 mL.维生素Bp中间液(4.9.2)定容至500 mL。